蛋白质层析分离纯化技术教材.ppt

蛋白质层析分离纯化技术*;蛋白质纯化策略融合蛋白质非融合;简易纯化选择载体和标记 纯化;GST 融合蛋白的纯化GST重;任何规模纯化都比较简单预装柱/;GST MicroSpin? ;GSTrap? 柱20 分钟内;GSTrap?结合缓冲液平衡加;GSTrap?SDS PAGE;Glutathione Sep;GST 融合蛋白的检测检测方法;GST融合蛋白的检测检测方法 ;GST 96-孔板 ELISA;(His)6 融合蛋白的纯化和;任何规模纯化都比较简单预装柱/;His MicroSpin? ;HisTrap? Kit每根 ;HiTrap? Chelati;HiTrap? Chelati;Chelating Sepha;检测 (His)6 融合蛋白检;检测 (His)6 融合蛋白检;其他融合 或 非融合蛋白的纯化;其他融合 或 非融合蛋白的纯化;其他融合 或 非融合蛋白的纯化;其他融合 或 非融合蛋白的纯化;其他融合 或 非融合蛋白的检测;去处小分子纯化后 (His)6;交换缓冲液和去盐的柱子快速有效;交换缓冲液和去盐的柱子HiTr;选择纯化设备纯化需要 Micr;选择纯化设备多步纯化 (非融合;大肠杆菌包涵体表达 (His);过程细胞培养收获细胞细胞破碎离;每 100 ml 培养液重新悬;溶解和准备样品重新悬浮细胞沉淀;准备 HiTrap? Chel;纯化和复性稀释样品, 用 10;组份分析1: LMW2: ;多维蛋白质纯化*;高效纯化策略粗提纯化精细纯化载;减少处理步骤得率 (%)95%;准备工作 考虑:纯度水平需要量;pH 的重要性: 蛋白质净电荷;pH 的重要性: 蛋白质净电荷;样品准备考虑:根据蛋白质来源选;三步纯化策略Step 纯度粗提;三步纯化策略步骤粗提精细纯化层;三步纯化策略步骤粗提精细纯化流;三步纯化策略步骤粗提精细纯化分;粗提目的纯化粗样快速浓缩 (减;粗提: 离子交换填料 预装柱 ;粗提: 疏水层析填料高载量高流;中度纯化目的 去除大部分杂质最;中度纯化: 离子交换填料Sep;中度纯化:疏水层析填料Seph;回收率载量精细纯化目的达到最终;精细纯化: 凝胶过滤填料Sup;精细纯化: 凝胶过滤填料Sup;精细纯化:离子交换填料Mono;精细纯化:离子交换和疏水层析填;精细纯化:反相层析填料Seph;Source?30 μm15 ;适用於三步纯化策略的层析技术蛋;适用於三步纯化策略的层析技术层;适用於三步纯化策略的层析技术层;纯化工艺中不同层析技术的衔接一;衔接层析技术时注意事项层析技术;合理衔接不同层析技术低溶解度的;合理衔接不同层析技术粗样或样品;合理衔接不同层析技术样品非常澄;一种不稳定，氧气敏感酶的纯化，;DAOCS去乙酰氧化头孢菌素 ;DAOCS - 纯化策略纯化目;DAOCS - 纯化目标得到 ;结晶纯需要大分子均一性 - 其;DAOCS - 定性参数 等;DAOCS - 一般准则在所有;准备样品悬浮细菌细胞在溶解缓冲;选择粗提的层析技术阴离子交换:;粗提 - 在 ?KTA?FPL;选择中度纯化技术HIC: 分离;选择精细纯化的层析技术GF:分;DAOCS - 优化好的粗提步;DAOCS -优化好的中度纯化;DAOCS -优化好的精细纯化;DAOCS - 用 SDS-P;DAOCS 纯化 - 结果粗提;DAOCS 纯化 - 结果DA;中度纯化DAOCS 纯化 - ;?KTA? 平台层析系统纯化 ;请参考中文网站www.apbi;谢谢欢迎您随时和我们联系sup