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第四章 生长繁殖及其控制(修改)
第四章 微生物的生长;一个微生物细胞;群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖;生物个体细胞原生质有规律地、不可逆增加,导致个体体积扩大(或重量增加) 的生物学过程。;;第一节 微生物的生长繁殖;一、细菌的生长繁殖;第一节 微生物的生长繁殖;细菌的生长曲线一般用菌数的对数为纵坐标作图;见P164;见P164;分裂迟缓、代谢活跃;迟缓期出现的原因:;在生产实践中缩短迟缓期的常用手段(见P164);对数生长期(Log phase):;①细胞快速分裂,生长速率常数R最大,细胞每分裂一次所
需世代时间(简称代时,又称增代时间)最短而稳定;
②菌体平衡生长,其个体形态、细胞化学组成和生理特征比
较均匀一致;
③酶活力高而稳定,代谢旺盛。 ;纳米细菌(nanobacteria),三天才分裂一次;
九十年代初期从地下数公里发现的超微型细菌,用代谢产生的CO2作指标,计算出这些超微菌的代谢速率仅为地上正常细菌的10-15,有人认为它们需要100年才能分裂一次。
;产生原因:由于营养物质不断被消耗,酸、醇、毒素或H2O2等有害代谢产物的累积和pH、氧化还原电位等环境变化,逐步不适宜于细菌生长,导致生长速率R降低直至零。
(即细菌分裂增加的数量等于细菌死亡数)。;①生长速率常数R等于零,活菌数保持相对稳定并达到最高水平,菌体产量也达到最高点;
②细菌分裂速率降低,代时逐渐延长,细胞代谢活力减退,开始出现形态和生理特征的改变;
③细胞内积累贮藏物质,如肝糖粒、异染颗粒、脂肪粒等;
④多数芽孢细菌在此阶段形成芽孢;
⑤许多重要的发酵代谢产物主要在此期大量积累并达到高峰。
例如,某些放线菌在此期开始以初生代谢物作前体,通过次生代谢途径合成大量的抗生素等对人类有用的各种次生代谢物。;活细菌数最高并且稳定,是发酵生产收获的重要时期;微生物的典型生长曲线;①细胞形态发生改变,呈现多种形态,有时产生畸形;
②细菌代谢活力降低,细菌衰老并出现自溶,释放代谢产物,
如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。
③有些G+细菌染色反应变为阴性;
④有的细菌进一步合成或释放对人类有益的抗生素等次生代谢物;而芽孢杆菌在此期释放芽孢。 ;研究生长曲线对研究工作和生产实践有指导意义。◆在研究细菌的代谢和遗传时,需采用生长旺盛的对数期的细胞;
◆在发酵生产方面,使用的发酵剂最好是对数期的种子接种到发酵罐内,几乎不出现迟缓期,控制延长在对数期,可在短时间内获得大量培养物(菌体细胞)和发酵产物,缩短发酵周期,提高生产率。;由于采用活菌计数比较麻烦,并要求严格进行操作,否则不易得到准确的结果,重复性也差,因此在实际工作中多采用分光光度计测定OD值的方法绘制细菌的生长曲线。;在细菌个体生长里,每个细菌分裂繁殖一代所需的时间为代时,在群体生长里细菌数量增加一倍所需的时间称为倍增时间(Doubling time)。代时通常以G表示。;影响微生物增代时间(代时)的因素:;二、真菌的生长繁殖;第一节 微生物的生长繁殖 二、丝状真菌的生长繁殖;三、微生物的同步培养;;同步培养物常被用来研究在单个细胞上难以研究的生理与遗传
特性和作为工业发酵的种子,它是一种理想的材料。;四、微生物的连续培养;四、微生物的连续培养;(1)恒浊器;(2)恒化器;在恒化连续培养中,必需将某种必需的营养物质控制在较低的浓度,以作为限制性因子,而其他营养物均过量。;通过控制流速可以得到生长速率不同但密度基本恒定的培养物;2.连续培养装置的类型;P171;第二节 环境因素对微生物生长的影响;对各种微生物的代谢过程产生影响,改变其生长速率。
温度对微生物生长的影响具体表现在:
①影响酶的活性。
②影响细胞膜的流动性。
③影响物质的溶解度。
④影响机体生物大分子的活性。;(1)微生物生长活动的温度类群 ;(1)微生物生长活动的温度类群 ;(1)微生物生长活动的温度类群 ;(1)微生物生长活动的温度类群 ;③嗜热微生物(又称高温型微生物)
嗜热微生物:45℃以上能生长,最适在50 ~60℃生长;;③嗜热微生物(又称高温型微生物);(2)微生物生长速率和温度的关系 ;(3)低温对微生物的影响 ;②影响冰冻对微生物作用的因素 ;(4)高温对微生物的影响 ;①热致死温度(TDP) 是指在一定时间内(一般为10min)杀死悬浮于液体样品中的全部微生物所需要的最低温度。
②热力致死时间(TDT) 是指在特定条件和特定温度下,杀死样品中一定数量微生物(通常为99.99%)所需要的最短时间。
③D值 在一定温度下,加热杀死活菌数减少90%(或减少一个对数周期)所需要的时间,即为D值,时间用min表示。
④Z值 在热致死时间曲线中,缩短90%(或减少一个对数周期)热致死时间所需要升高的
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