20.1乳腺干细胞-8.30(综述)汇.doc

 PAGE 4 杭州百通生物技术有限公司 总部电话：(0571 Email:  HYPERLINK mailto:info@info@ 北京办事处电话：(010 Email:  HYPERLINK mailto:order@order@ 上海办事处电话：(021 广州办事处电话：(020 网站：www. biowish. com www. stemcell. com 乳腺干细胞 John Stingl, PhD/主治医师 Andrea Eskandar Afshari，硕士，产品经理 乳腺 乳腺是一种管-泡结构腺体，由多个管状分支和囊泡结构（小叶）组成，哺乳期管状结构与小叶相连。小鼠乳腺上皮埋于脂肪垫中，但人乳腺上皮包埋于纤维脂肪结缔组织中，而纤维组织与上皮紧密接触。在人和小鼠乳腺中，上皮由两种上皮细胞组成：腔上皮细胞和肌上皮细胞。腔上皮细胞为方形或柱状，排列于乳腺管或小叶腔，在哺乳期与乳汁分泌有关。肌上皮细胞表达平滑肌肌动蛋白，具有收缩功能，位于腔上皮下接近基底膜附近。大约3-8%乳腺上皮细胞不表达终末分化表型，在细胞级系中可能处于更高的位置1，2。人们推测，乳腺上皮的生成和维持是通过乳腺干细胞（mammary stem cells, MaSC）完成的。MaSC具有自我更新能力，是产生乳腺管状和小叶状结构的基础，能分化为所有系列乳腺上皮细胞。近来的研究提示，乳腺癌是由于乳腺干细胞或接近干细胞水平的祖细胞病变引起3，因此，乳腺干细胞的研究越来越受到肿瘤学家的重视。 小鼠乳腺干细胞 1998年，Kordan和Smith等研究证实，单个的小鼠乳腺上皮细胞可以自我更新，并产生管状和小叶状上皮细胞，因此符合MaSC的标准4。MaSC广泛存在于乳腺分支中，将乳腺上皮的任何一段移植到去除上皮的脂肪垫上，就能重建上皮细胞，最多可以连续移植7次才失去重建能力5-8。这些重建管状和小叶状上皮细胞的乳腺细胞，称为乳腺重建单位（mammary repopulating units, MRU）。MRU在青春期发育过程中乳腺管的膨胀末端分布最广，而在分泌乳汁的小叶含量最低1，2。透射电子显微镜下，乳腺组织中有一群发亮的小细胞（称为小光亮细胞，small light cells, SLC），可能是MaSC或与其水平相近的祖细胞1,2。这些细胞位于乳腺上皮组织，比例为3%，不存在于处于生长停滞期上皮9。SLC细胞能进行有丝分裂，且能形成腔状或肌上皮细胞，因此，不可能是跨过上皮细胞层的淋巴细胞。可惜的是，没有对这群在形态上定义为SLC的细胞进行进一步的功能研究，也没有建立分离SLC的方法。 另外，有研究者推测在青春发育阶段，位于乳腺管延长端的帽细胞也可能是MaSC10-12。帽细胞只存在于腺管末端，低表达腔上皮和肌上皮特有的标志。有研究者认为，这些细胞可能是啮齿类动物乳腺干细胞10-12。但是，也有作者认为，这些帽细胞只是肌上皮祖细胞，与腺管发育过程中腺管的延伸有关13。像SLC一样，也没有功能试验证明帽细胞具有重建上皮结构的功能。 Welm等的实验首次表明， Sca-1阳性细胞富含MRU；将细胞移植给去除脂肪垫的小鼠后，能够重建管-叶结构14。随后的研究又证明，Sca-1阳性细胞群中低表达Sca-1的细胞富含MRU，这群细胞的表型特征为CD45-，TER119-，CD31-， lin-，CD24+，CD29hi，CD49fhi；利用上述标记筛选细胞，每20-90个细胞中就有一个MRU15，16。这些MRU细胞符合MaSC的标准，单个细胞首次或再次移植，均可产生乳腺组织16。免疫组织化学分析显示，这群富含MRU的细胞不表达雌激素和孕酮受体17。集落形成细胞（CFC）实验显示，乳腺细胞中的CFC存在于lin-/CD24hi的腔上皮细胞中，而且，大多数的CFC雌激素受体阴性15,16,18。有一群CFC存在于基底膜，表型为lin-/CD24lo ，能产生肌上皮细胞19。 将乳腺内皮细胞极限稀释，然后输注给去除脂肪垫的小鼠，发现细胞群体中含有管状或小叶上皮定向祖细胞，两者均来源于MaSC20,21。目前，尚不清楚这两种祖细胞的表型特点及在组织中的丰度。另一种乳腺上皮祖细胞与妊娠有关，在第一次妊娠时出现，二次妊娠时发育为上皮祖细胞21，22。17，18 这群细胞先进行产乳细胞分化，在妊娠后乳腺再塑期并不发生凋亡；相反，细胞分布于腔状上皮内，在以后再次妊娠时作为小叶祖细胞发挥作用。 人乳腺干细胞 早期的实验多利用CFC检定乳腺上皮中原始细胞的存在。实验表明，人乳腺上皮内存在三种祖细胞：腔上皮定向祖细胞（EpCAM