8食品中维生素A含量的测定.ppt.ppt

营养与食品卫生学教研室;【目的】 1．了解高效液相色谱法测定维生素A的原理。 2．熟悉高效液相色谱仪的使用。 3．掌握高效液相色谱法测定维生素A的基本操作技术。 【原理】 样品中的维生素A经皂化提取处理后，将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中。用高效液相色谱法C18反相柱将维生素A分离，经紫外检测器检测，并用内标法定量测定。 ;;;;;;（1）皂化 称取1～10g样品，置于250ml皂化瓶中，加30ml无水乙醇，进行搅拌，直到颗粒物分散均匀为止。加100g/L抗坏血酸溶液5ml，10mg/ml苯并[e]芘标准液0.4ml，混匀。再加10ml氢氧化钾溶液，混匀。于沸水浴上回流30min使皂化完全。皂化后立即放入冰水中冷却。;;;;;（1）维生素A极易被破坏，实验操作应在微弱光线下进行，或用棕色玻璃仪器。 （2）在皂化过程中，应每5分钟摇一下皂化瓶，使样品皂化完全。 （3）提取过程中，??摇不应太剧烈，避免溶液乳化而不易分层。 （4）洗涤时，最初水洗轻摇，逐次振摇强度可增加。 （5）无水硫酸钠如有结块，应烘干后使用。 （6）在旋转蒸发时乙醚溶液不应蒸干，以免被测样品含量损失。 （7）用高纯氮吹干时，氮气不能开的太大，避免样品吹出瓶外结果偏低。;Thank You !