高效液相色谱法同时测定鸭梨种子中3种内源激素的论文.docVIP

　　高效液相色谱法同时测定鸭梨种子中3种内源激素的论文 高效液相色谱法同时测定鸭梨种子中3种内源激素 【摘要】 　　建立了高效液相色谱同时测定鸭梨种子中3种内源激素赤霉素(ga3)、生长素(iaa)和脱落酸(aba)含量的方法。采用c18反相色谱柱，柱温35 ℃，以甲醇水(含1%乙酸)(4∶6， v/v)为流动相，流速为1 ml/min， 检测器波长开始用254 nm， 2.5 min时将波长切换至210 nm，至3.8 min，ga3出峰结束后，再次将波长切换回254 nm测定iaa和aba。ga3、iaa和aba的平均回收率分别为92.8%、91.6%和94.7%。为快速、准确分离和测定鸭梨种子内源激素提供了一种可靠方法。 【关键词】 高效液相色谱; 内源激素; 鸭梨; 种子 　　simultaneous determination of three kinds of endogenous　hormones content in seeds of postharvest yali pear by　high performance liquid chromatography 　　yan shijie, guo lient of tianjin agricultural university, tianjin 300384) 　　2(college of food science and engineering, shanxi agricultural university, taigu 030801) 　　3(college of forest resources and environment, nanjing forestry university, nanjing 210037) 　　abstract a high performance liquid chromatographic (hplc) method for the simultaneous determination of three kinds of endogenous hormone gibberellin (ga3), auxin (iaa) and abscisic acid (aba) content in seeds of postharvest yali pear atographic separation n using methanol∶obile phase at a column temperature of 35 ℃. the flol/min. uv detection at 210 nm 2.5 min to 3.8 min, aining separations. average recoveries ethod for rapid, accurate separation and determination endogenous hormone in yali pear seeds. 　　keyance liquid chromatography; endogenous hormones; yali pear; seed 　　1 引 言 　　果实的生长成熟是一个复杂的生理生化过程，植物激素与果实的发育及成熟程度有关，而种子又是激素合成的主要场所[1]，因此，掌握内源激素在种子中的变化规律，对研究水果在采摘后的生理、成熟、衰老及褐变过程具有重要意义[2]。. 　　植物激素在植物体内含量甚微，而且其在植物体内的组成复杂，相互共存的干扰组分多，对温度等条件敏感，因而对植物激素的测定比较困难[3]。高效液相色谱(hplc)是较理想的植物内源激素分析方法，植物激素的hplc测定已在仁用杏花芽[4]、甜樱桃[5]、梨[6]等果实， 油菜[7]、莴苣[8]等籽粒上有所应用，对植物种子方面，主要集中在银杏[9]、山楂[10]、甜樱桃[5]、五味子[11]、早蜜梨和黄金梨[6]等种子的激素含量测定上，而对鸭梨种子中激素的分离、测定还未见。由于在联合测定植物组织抽提液中的多种内源激素时，经常出现分离差、峰型不良及严重拖尾现象，因此选择合适的内源激素提取方法和色谱条件尤为重要[12]。本研究采用高效液相色谱法对鸭梨种子中的赤霉素(ga3)、吲哚乙酸(iaa)、脱落酸(aba) 3种植物激素进行联合分离与测定，建立起灵敏、简便、快速测定植物种子激素的方法。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器、试剂与材料 　　1200 型高效液相色谱仪(美国agilent公司)，包括1200四元梯度泵、1200va公司);pvpp(sigma公司);甲醇(色谱纯，德国merck公司);乙酸、乙酸乙酯和石油醚(分析纯，天津大学科威公司);实验用水为