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方法3610 氧化铝柱净化 1.0适用范围 1.1范围：氧化铝是一种高度多孔的和粒状的氧化铝。可在3个pH范围(碱性、中 性、酸性)应用于柱色谱法中。它可用于从不同化学极性的干扰化合物中分离出待测物。 1.2一般应用(Gordon和Ford)。 1.2.1碱性(B)pH(9～10)：用途：碱性和中性化合物，对于碱、醇类、烃类、自族化合物类、生物碱类、天然颜料等是稳定的。缺点：可引起聚合、缩合和脱水反应； 不能用丙酮或乙酸乙酯作为洗脱液。 1.2.2中性(N)：用途：醛类、酮类、醌类、酯类、内酯类、配糖物。缺点：比碱 性形式活性小很多。 1.2.3酸性(A)pH(4～5)：用途：酸性颜料(天然的和合成的)、强酸类(在不 同情况下对中性和碱性氧化铝有化学吸附)。 1.2.4活性等级：酸性、碱性或中性氧化铝根据Brockmann标准，通过向第I级中 (在400～450℃加热至不再失水来制备)加水可以制备成不同的活性等级(I～V)。 Brockmann标准(Gordon和Ford，374页)转载于下：①加入水量(重量％)：0、3、 6、10、15；②活性等级：I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V； = 3 \* GB3 ③ RF(对氨基偶氮苯)：0.0、0.13、0.25、 0.45、0.55。 1.3特殊应用.本法包括净化含有酞酸酯类和亚硝胺类的样品提取物的指导。对于 用氧化铝柱净化石油废物，参见方法3611。 2.0方法摘要 2.1 用所需量的吸附剂装填柱。上部装填吸水剂，然后负载待分析的样品。待测物 的洗脱用合适的溶剂以实现，使干扰化合物留于柱上，然后浓缩洗脱液。 3.0干扰 3.1在使用此方法之前，对欲测定的化合物应作试剂空白。在将此法应用于实际样 品之前，干扰量必须低于方法检测限。 3.2除本法中所述之外的其它更多的方法对试剂纯化可能是需要的。 4.0仪器和设备 4.1色谱柱。300mm×10mm内径，底部有硬质玻璃棉和聚四氟乙烯活塞。 注意：烧结的玻璃圆盘在通过严重污染的提取物之后是很难去污的。可购买无烧结圆 盘柱，用一个硬质玻璃棉小垫来保持吸附剂。在用吸附剂填充柱之前，先用50ml丙酮， 然后用50ml的洗脱溶剂预洗玻璃棉垫。 4.2烧杯。500m1。 4.3试剂瓶。500m1。 4.4马弗炉。 4.5～4.8见方法3510第4.3～4.6节。 4.9锥形烧瓶。50和250m1。 5.0试剂 5.1硫酸钠(ACS)。粒状，无水(在浅盘中于400℃加热4h予以纯化)。 5.2洗脱溶剂。 5.2.1二乙醚：农药级或相当规格。 5.2.1.1必须无过氧化物，用EM Quant检验条(检验条可从EM实验公司获得， 500 Executive Blvd，Elmsford，纽约10523)。 5.2.1.2清除过氧化物所推荐的方法配有检验条。净化之后，必须在每升醚中加入 20ml乙醇保存。 5.2.2 甲醇、戊烷、己烷、二氯甲烷：农药等级或相当规格。 5.3氧化铝。 5.3.1酞酸酯提取液的净化：中性氧化铝，活性为Super I，W 200系列(ICN生命 科学组，No.404583)。为使用作准备，将100g的氧化铝放入500ml烧杯中，并在400℃加热大约16h。在加热后，转入500ml试剂瓶中。密封并冷却至室温。当冷却时，加3ml 试剂水。摇荡或转动10min使其充分混合，令其放置至少2h。使瓶紧密地封闭。 5.3.2亚硝胺提取液的净化：碱性氧化铝，活性为Super I·W 200系列(同上述 5.3.1节)。为使用作准备，将100g的氧化铝放入一个500ml试剂瓶中并加2ml试剂水， 摇荡或转动10min使其充分混合，令其放置至少2h。在使用之前，制备应均匀。使瓶紧 密地封闭以确保原来的活性。 5.4试剂水。试剂水定义为在欲测定化合物的方法检测限内检测不到干扰物的水。 6.0样品的采集、保存和处理 6.1参见本章绪论，有机分析物第4.1节 7.0步骤 7.1酞酸酯类。 7.1.1 在净化之前，将样品捉取液的体积减少至2m1。萃取溶剂必须为已烷。 7.1.2将10g氧化铝放入色谱柱中装实氧化铝；加lcm的无水硫酸钠至顶部。 7.1.3用40ml己烷预先洗提柱。所有的洗脱速度应约为2ml／min，弃去洗脱液， 并在硫酸钠层刚要暴露于空气之前，定量地转移2ml样品提取液至柱上，使用另外的2ml 己烷使全部转