茚三酮反应实验报告.doc

茚三酮反应实验报告 生化实验报告 目 录 实验一 蛋白质及氨基酸的颜色反应 ............................................................................0 实验二 氨基酸的分离鉴定——纸层析法 .....................................................................5 实验三 蛋白质的性质实验 ............................................................................................7 实验四 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 ............................................................................9 实验五 考马斯亮蓝法（Bradford法）测定蛋白质含量 .......................................... 12 实验六 血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳 ................................................................. 14 第二部分 附 录 ........................................................................................................... 17 附录Ⅰ 实验室规则与应急处理 ................................................................................. 17 附录Ⅱ 实验记录和实验报告的书写 ......................................................................... 18 附录Ⅲ 实验室基本操作 ............................................................................................. 19 附录Ⅳ 实验所需的药品、试剂的配制 ..................................................................... 22 附录Ⅵ 实验所需的设备及其使用方法 ..................................................................... 25 实验一 蛋白质及氨基酸的颜色反应 一、目的和要求 1、了解蛋白质和某些氨基酸的特殊颜色反应及其原理。 2、掌握几种常用鉴定蛋白质和氨基酸的方法。 二、仪器与试剂 （一）仪器 1、试管；2、试管架；3、恒温水槽；4、酒精灯；5、电吹风机；8、分析天平。 （二）试剂 1、蛋白质溶液：将鸡蛋清用蒸馏水稀释10~20倍，多层纱布过滤，滤液4oC保存； 2、氢氧化钠溶液（10%）：称取20.0g NaOH，蒸馏水溶解并定容至200mL； 3、硫酸铜溶液（1%）；称取2.0g CuSO4，蒸馏水溶解并定容至200mL；4、甘氨酸溶液（0.5%）： 色氨酸溶液（0.5%）： 酪氨酸溶液（0.5%）： 精氨酸（0.5%）： 组氨酸溶液（0.5%）： 苯丙氨酸酸溶液（0.5%）： 蛋氨酸溶液（0.5%）： 半胱氨酸溶液（0.5%）： 分别称取各氨基酸1.0g，蒸馏水分别溶解并定容至200mL，4oC保存； 5、茚三酮水溶液（0.1%）：称取0.1g茚三酮，蒸馏水溶解并定容至100mL； 6、茚三酮-乙醇溶液（0.1%）：称取0.1g茚三酮，乙醇溶解并定容至100mL，即用即配； 7、头发，指甲屑； 8、浓硝酸（比重1.42）：浓盐酸；浓硫酸（分析纯）；冰醋酸（一般含有乙醛酸杂质， 故可用冰醋酸代替乙醛酸）； 9、苯酚溶液（0.5% ）：称取1.0g苯酚，蒸馏水溶解并定容至200ml； 10、α-萘酚乙醇溶液（1%）：称取1.0g α-萘酚，95%乙醇溶解并定容至100ml即用即配； 11、 NaBrO溶液：2克溴溶于100ml 5% NaOH中，置棕色瓶中，可在暗处保存两周 12、鸡蛋清： 13、偶氮试剂：溶液A（称取5.0g亚硝酸钠溶于1000ml蒸馏水中）；溶液B（称取5.0g对氨基苯磺酸溶于1000ml水中，溶解后再加入5ml浓硫酸）；A、B溶液分