不同产地防风多糖含量比较.docVIP

　　不同产地防风多糖含量比较 【摘要】 目的比较不同产地防风多糖的含量。方法利用苯酚-硫酸法测定防风多糖的含量。结果安国的防风多糖含量最高为2.53%，围场的防风多糖含量最低为1.57%。结论不同产地防风药材中多糖的含量不同，可能与产地、采摘时间有关，此可供防风的进一步开发利用 参考 。 【关键词】 防风； 多糖； 苯酚-硫酸显色法 Abstract：ObjectiveTo pare polysaccharide content of Radix Saposhnikoviae from different areas. MethodsThe polysaccharide content Radix Saposhnikoviae etry. ResultsThe polysaccharide content of Radix Saposhnikoviae in Anguo ay lie on its respective producing area and picking time,etry 防风为伞形科植物防风Saposhnikovia divaricata (Turcz.)Schischk.未抽花茎植株的干燥根，入药始见于我国第一部中药专著《神农本草经》，具有解表祛风、胜湿止痉的功能，主要分布在我国的东北，华北等地［1，2］。防风中主要的化学成分有挥发油、色原酮、香豆素、有机酸、多糖等［3］。研究证明防风多糖具有明显的体内抗肿瘤作用［4，5］。本实验利用苯酚-硫酸法测定了不同产地药材防风多糖含量，为防风药材的开发应用提供基础数据。 1 仪器与药品 1.1 仪器756紫外可见光分光光度计（上海分析仪器总厂）；真空干燥箱（天津市泰斯特仪器有限公司）；MP1100B型 电子 天平（上海精科天平厂）；分析天平（日本）。 1.2 药品无水葡萄糖（ 中国 药品生物制品检定所）；硫酸（天津化学试剂有限公司）；苯酚（分析纯）；无水乙醇（天津化学试剂有限公司）；三蒸水（实验室自制）；防风药材购自张家口、昌平、安国和围场，经本院中医系马淑兰教授鉴定；防风对照药材购自中国药品生物制品检定所。 2 方法 2.1 防风多糖的提取精密称取不同产地已粉碎、真空干燥的防风药材450.0 g，加入1 000 ml无水乙醇回流提取2 h，以除去单糖及其它醇溶性成分，过滤，滤渣干燥，加入1 000 ml三蒸水回流提取2h，趁热过滤，滤渣再加入1 000 ml三蒸水回流提取2h，合并两次滤液，减压浓缩，12 000 r/min 离心20 min，上清四倍体积无水乙醇沉淀静置过夜，抽滤，沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、石油醚洗涤，真空干燥即得防风多糖。 2.2 5.0%苯酚标准液的制备取苯酚100 g，加铝片0.1 g和碳酸氢钠0. 05 g，常压蒸馏，收集180～182℃馏分称取该馏分5 g，置100ml容量瓶中，加三蒸水稀释至刻度，摇匀后滤过至棕色试剂瓶中，得5%苯酚溶液，置4℃冰箱备用。 2.3 葡萄糖标准液的制备精密称取105℃真空干燥的葡萄糖标准品50 mg，置50 ml容量瓶中，加三蒸水定容至刻度，即得1.00 mg/ml的葡萄糖标准液。 2.4 样品溶液的制备精密称取不同产地已粉碎、真空干燥的防风药材0.50 g，加入100 ml无水乙醇回流提取2 h，过滤，滤渣干燥，加入100 ml三蒸水回流提取2 h，趁热过滤，滤渣再加入100 ml三蒸水回流提取2 h，合并两次滤液，减压浓缩，12 000 r/min 离心20 min，上清四倍体积无水乙醇沉淀静置过夜，抽滤，沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、石油醚洗涤，真空干燥后在100 ml量瓶中以蒸馏水定容，作为样品溶液。 2.5 标准曲线的绘制精确移取葡萄糖标准液10，15，20，25，30，35 μl，分别加入990，985，980，975，970，965 μl三蒸水，加入5%苯酚溶液500 μl，迅速加入浓硫酸2.5 ml，静置20 min，以试剂空白为参比，在490 nm波长下测D值，得回归方程：A=0.061C-0.000，r=0.997。 2.6 换算因素测定精密称取真空干燥至恒重的防风多糖10 mg，置于250 ml容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，作贮备液。精密吸取贮备液0.3 ml按“2.5”项下的方法测定吸光度。另精取葡萄糖标准液0.3 ml同法操作，求出防风多糖中的葡萄糖含量。按下式 计算 换算因素f结果。f=2.47（f=多糖含量/多糖溶液中的葡萄糖含量×稀释倍数）。 2.7 精密度实验取同一样品溶液，重复测定吸光度6次，RSD为1.06%。结果表明精密度良好。 2.8 重现性实验取同一批样品溶液6份，平行测定吸光度，RSD为1.43%，表明