两种检测器测定党参中苍术内酯Ⅲ含量的比较.docVIP

　　两种检测器测定党参中苍术内酯Ⅲ含量的比较 【关键词】 检测器 摘 要：目的：以蒸发光散射检测器（ELSD）测定党参中苍术内酯Ⅲ的含量，并与二级管阵列检测器（PAD）测定结果进行比较。 方法 ：采用RP-HPLC法，Hypersil ODS2柱（5 μm，4.6 mm×250 mm），甲醇-水为流动相（67∶33），流速1.0 mL/min， 柱温30 ℃。结果：用ELSD检测党参药材中苍术内酯Ⅲ的回归方程为 A=1.30×104C－2.33×104， 相关系数r=0.9938， 平均回收率为103.65 %， RSD为 0.93 %。结论：以ELSD测得的党参药材中苍术内脂Ⅲ的含量与PAD测得的党参药材中苍术内脂Ⅲ的含量基本一致，以 ELSDRPHPLC法测定党参药材中苍术内脂Ⅲ的含量的方法简便、易行、准确、可靠。 　　关键词：蒸发光散射检测器；RPHPLC；二级管阵列检测器；苍术内酯Ⅲ；含量测定 　 党参为常用中药材，有补气、益血、生津的功能，还具有升高血糖、促进造血机能、调节胃肠收缩及抗溃疡等多种作用。《中华人民共和国药典》2000年版收载党参Codonopsis Pilosula（Franch.） Nannf.、素花党参Codonopsis Pilosula Nannf.var.modesta（Nannf.）L.T.shen或川党参Codonopsis tangshen Oliv.三种〔1〕。王峥涛等从党参分离出的倍半萜内酯类化合物苍术内酯Ⅲ被证明具有明显的抗炎活性〔2-3〕，并与郝桂明等分别用正向和反向高效液相色谱法 分析 了党参药材中苍术内脂Ⅲ的含量〔4-5〕,所用检测器均为紫外检测器，本文采用蒸发光散射检测器对甘肃产党参中苍术内酯Ⅲ进行了测定,并与二极管阵列检测器测定结果进行了比较，发现两种检测器测得的结果基本一致，现将结果报告如下。 　 　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　，4.6 mm×250 mm）由大连依立特公司生产，Kromasil ODS保护柱（5 μm，4.6 mm×10 mm），流动相为甲醇-水（67∶33），流速1.0 mL/min， 柱温30 ℃。ELSD 检测器参数：载气流速为2.2 L/min，漂移管温度为80 ℃。PAD检测波长220 nm，其他色谱条件同ELSD检测器。 　　2.2 标准曲线的绘制 　　精密称取苍术内酯Ⅲ 10.98 mg，加甲醇超声溶解，定容于10 mL容量瓶中，作为贮备液。精密吸取苍术内酯Ⅲ贮备液1 mL，甲醇定容至5 mL。再精密吸取0.4 mL、 0.6 mL、 0.8 mL、 1.0 mL、 1.2 mL，分别置于10 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，得5个系列浓度的对照品溶液，按上述色谱条件，进样10 μL，重复测定3次，以峰面积A为纵坐标、浓度C为横坐标绘制工作曲线，用ELSD检测回归方程为：A=1.30×104C－2.33×10 4，相关系数r=0.9938，线性范围为0.08784～0.26352 μg。 测： 精密吸取苍术内酯Ⅲ贮备液0.2 mL、 0.4 mL、 0.6 mL、 0.8 mL、 1.0 mL、 1.2 mL，分别置于10 mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，得6个系列浓度的对照品溶液，进样10 μL，每个浓度重复测定3次，按上述色谱条件测定，以峰面积A为纵坐标，以浓度C为横坐标绘制工作曲线，回归方程为：A=2.75×105C－2.02×105， 相关系数r=0.9998，线性范围为0.2196～1.3176 μg。 　　2.3 样品测定 　　用四分法取样，精密称取党参药材样品5.0 g，置25 mL具塞三角瓶中，加甲醇超声提取3次（均为30 mL），每次30 min，过滤，蒸干甲醇。残渣用30 mL水溶解，用水饱和的正丁醇萃取4次（30 mL、30 mL、20 mL、15 mL）合并正丁醇液，减压蒸干，残渣用甲醇定容至5 mL，用0.45 μm微孔滤膜过滤，滤液仍用上述色谱条件分析，外标法 计算 含量，结果见表1，色谱图见图1、图2。表1PAD与ELSD测得党参中苍术内酯Ⅲ的含量（n=3）样品来源 　　2.4 精密度试验(ELSD法) 　（1）日内精密度：取2.2项下系列标样溶液4 μL、10 μL重复进样3次，测定峰面积，RSD为0.42 %。（2） 日间精密度：取3号样品溶液分别在0天、1天、2天、3天、4天分别进样，测定峰面积，RSD为0.34 %。 　　2.5 重复性试验(ELSD法) 　　精密称取3号样品5.0 g 4份，按2.1项下操作，测定苍术内酯Ⅲ的含量，RSD为1.38 %。 　　2.6 加样回收率试验(ELSD法)精密称取5份已测含量的党参药材粉末5.0 g,加入苍术内酯Ⅲ0.40 mg，按2.