乙醇对慢性丙型肝炎患者HCV基因型分布及肝损害的影响.docVIP

　　乙醇对慢性丙型肝炎患者HCV基因型分布及肝损害的影响 作者：孙慧慧　王敏　张孝国　陈建　刘靓文　智绪亭 【摘要】 目的：对比嗜酒与非嗜酒的慢性丙型肝炎(chronic hepatitis C，CHC)患者HCV RNA基因型及分布，以明确嗜酒的CHC患者病情 发展 是否与某种特定基因型有关。检测CHC患者IFN-γ 及TNF-α水平，了解嗜酒的HCV感染者肝损害的机制。方法：收集CHC患者114名，分为嗜酒组和非嗜酒组，以基因芯片技术对2组患者进行HCV RNA基因分型。采用Ficoll梯度离心法提取所有患者外周血单个核细胞(PBMC)并培养，ELISA法检测IFN-γ及TNF-α的水平。结果：嗜酒组和非嗜酒组HCV RNA的基因型均以1b型为主(嗜酒组的比例为60%，非嗜酒组为43.75%)，二者之间无统计学意义(P=0.22)。嗜酒组和非嗜酒组的HCV RNA定量测定分别为(11 100±14 174.3)×103 mL-1和(3 927.8±4 549.6)×103 mL-1，二者比较差异有统计学意义(P=0.025)。嗜酒组和非嗜酒组TNF-α水平分别为(4 528±3 587) ng/L和( 3262±3 131) ng/L，二者相比差异有统计学意义(P=0.048)，但2组IFN-γ水平差异无统计学意义(Pgt;0.05)。结论：乙醇促CHC肝患者HCV RNA复制，导致肝损伤加重，但并不能增加慢性HCV感染者对某种HCV RNA基因型的易感性。TNF-α在嗜酒的CHC患者中起重要作用，是导致肝损害的重要细胞因子之一。 【关键词】 肝炎病毒，丙型·乙醇·基因型·IFN-γ·TNF-α 　　【ABSTRACT】 Objective：To analyze the genotypes of HCV RNA in alcoholic and nonalcoholic HCV patients and contrast the distribution of the genotypes betechanism of hepatic lesion in alcoholic HCV patients. Method： 114 HCV patients, according to the history of alcohol abuse, ed by gene chip technique. Liver biopsy titers of HCV RNA of alcohol group l and the nonalcohol group l,and there ong 18 alcoholic patients of 30 patients practiced liver biopsy, thEir liver inflammation ote the copies of HCV RNA in HCV patients and aggravate liver injury, but cant add susceptibility to certain genotypes of HCV RNA. The liver inflammation of alcoholic patients is higher than that of nonalcoholic patients. TNF-α,portant effect in alcoholic HCV patients , is one of the important mechanisms in the liver injury . 　　【KEY I1 640培养液购自Gibico公司;细胞因子ELISA检测试剂盒购自晶美公司。 　　1.3　检测指标和方法 　　1.3.1　血清HCV RNA基因分型　用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测所有患者的HCV RNA，记录HCV RNA的拷贝数。对HCV RNA阳性患者采用基因芯片技术进行基因分型。 　　1.3.2　PBMC的提取和细胞因子的检测　采用Ficoll梯度离心法提取所有患者外周血PBMC。将分离的PBMC用含有100 mL/L混合人血清的完全RPMI 1640培养液稀释细胞密度为5×109 L-1。以100 μL/孔加于96孔板，37 ℃、50 mL/L CO2孵箱中培养，72 h后收集培养上清，-20 ℃冻存。同时设不加细胞的阴性对照和加入ConA(刀豆蛋白，2 mg/L)刺激的阳性对照。用ELISA法检测上清中IFN-γ及TNF-α的水平。 　　1.4　统计学处理　应用SPSS 13.0统计软件包进行分析，数值型变量以x±s表示，样本均数的比较采用t检验，计数资料间比较采用χ2检验(或四格表精确概