乙醛脱氢酶2基因多态性与老年冠心脏病的相关性.docVIP

　　乙醛脱氢酶2基因多态性与老年冠心脏病的相关性 【摘要】 　　目的 探讨乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因G487A多态性与老年冠状动脉粥样硬化性心病(CHD)患者的关系。方法 320例行冠状动脉造影的老年患者，根据造影结果分为CHD组169例和非CHD组(对照组)151例，利用多聚酶链反应技术，检测ALDH2基因G487A多态性。结果 基因型频率符合HardyI）122例〕，男102例，女67例，年龄61～76岁，平均(67.06±4.10)岁，诊断符合aster Mix 25 μl，引物各2 μl，双蒸水补足至50 μl。反应条件：94℃预变性3 min后进入循环：94℃变性45 s，60℃退火30 s，72℃延伸45 s，共35个循环，最后72℃延伸5 min，4℃保存。PCR扩增产物为200 bp。扩增产物在2%琼脂糖凝胶中进行电泳，溴乙啶染色，紫外线分析凝胶成像系统下观察电泳结果。将目标条带切下，使用琼脂糖凝胶回收试剂盒将PCR产物纯化，由济南博亚生物技术有限公司提供目的基因片段测序。 　　1.4 统计学方法 　　采用SPSS13.0统计软件，所有计量资料数据以x±s表示，组间比较行t检验，计数资料以频数表示，组间比较行χ2检验，Logistic回归分析CHD的危险因素。 　 　2 结果 　　2.1 ALDH2基因测序结果 　　经人工读取测序结果，ALDH2基因型有3种：AA型，GG型和AG型。见图1。 　　2.2 两组一般资料比较 　　CHD组的HDLC水平低于对照组(Plt;0.05),其余各项水平差异无统计学意义(Pgt;0.05)。见表1。表1 两组一般资料比较(略) 　　2.3 基因型及等位基因频率分布 　　两组基因型分布均符合HardyI(P=0.010,OR=2.663,95% CI:1.260～5.628)的发生,HDLC则主要作用于MI患者(P=0.021,OR=2.445,95%CI:1.114～5.225)。 　 　3 讨论 　　人类乙醛脱氢酶（ALDH）是一种四联体蛋白，催化乙醛和其他脂肪族醛氧化。目前已发现ALDH有19种同工酶，主要有ALDH1～4四种，由位于四个不同染色体的独立基因位点编码〔4〕，ALDH2基因位于染色体上12q24。由于ALDH2基因存在G487A多态性，所以有两个等位基因，其中具有催化活性的野生型称为：G等位基因（ALDH2*1），催化能力失活的变异型称为：A等位基因（ALDH2*2）。 　　日本学者Takagi等〔2〕报道日本人群中ALDH2基因AA型是CHD的危险因素。他们发现CHD发病率、饮酒量和HDLC浓度在三个基因型组间有显著差异，Logistic多因素回归分析表明HDLC自变量会降低AA型者患MI的风险，饮酒量会减弱ALDH2基因型与HDLC间的关联性，故他们推测AA型可能通过影响饮酒量引起HDLC浓度下降而致MI。本研究中ALDH2是酒精代谢中的一个关键酶，携带ALDH2A等位基因者由于体内ALDH2酶活性下降或缺失，饮酒后乙醛浓度增加会引起不良反应，故携带ALDH2A等位基因的人饮酒量通常会较低。目前已证实适量饮酒能通过影响HDLC、糖化血红蛋白、纤维蛋白原对心血管起保护作用〔5〕，饮酒量的减少是否会通过影响这三个因素成为CHD的危险因素目前尚未知晓。本研究在调整混杂因素后,AA+AG基因型患CHD危险性是GG型的2.426倍,提示A等位基因可能是CHD的独立危险因素之一,这与Takagi等〔2〕的研究结果一致。综上所述ALDH2基因G487A多态性与CHD发生有关,但由于各研究人群的种族、地域以及样本数量存在差异,究竟是A还是G等位基因影响CHD的发生,结果尚不一致。 　　回归分析显示，ALDH2基因G487A多态性与低HDLC有明显的协同作用。有研究表明ALDH2在肝、肾、心脏中有较高表达，它与生物氧化有密切关系〔6〕。在缺氧心肌中ALDH2基因下调，ALDH2对氧化刺激导致的神经细胞、内皮细胞损伤有明显的拮抗作用〔7，8〕。魁北克心血管研究证实,HDL水平每降低10%，发生CHD的危险增加13%〔9〕,HDL与MI、脑卒中、猝死、冠状动脉成形术后再狭窄、严重的早发CHD的发生高度相关〔10〕。已知HDL有多种抗AS功能,其最重要的抗AS功能是HDL能与血管壁上细胞发生交互作用从而能使血管壁上多余的胆固醇逆向转运至肝脏,通过肝脏的处理胆固醇可变成胆酸盐〔11〕。HDL还具有许多其他抗AS功能:逆转内皮细胞功能失调,刺激前列环素(具有扩张血管、抗栓作用)产生,抑制内皮细胞凋亡及血小板聚集性,同时还能抑制低密度脂蛋白氧化〔12〕。多元回归显示,低HDLC仅升高MI的发病率,可能是由于将MI由CHD分离出来