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乳腺癌组织中VEGF和C.doc
乳腺癌组织中VEGF和C
作者:粟连秀,张兆明,陈红秋,杨达平,李雄
【摘要】 目的 探讨乳腺癌组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)及原癌基因C-erbB-2的表达及其与临床病理特征之间的关系。 方法 采用快捷免疫组化MaxVisionTM法,对80例乳腺癌组织和20例乳腺良性病变组织中VEGF及C-erbB-2的表达进行检测。结果 VEGF与C-erbB-2在乳腺癌的阳性表达率分别为62.50%和35.00%,高于在乳腺良性病变组织中的零表达(P均<0.01)。VEGF和C-erbB-2的阳性表达与乳腺癌患者的年龄、肿瘤大小和组织学分型无关(Pgt;均0.05),而与腋窝淋巴结转移有关(P<0.05或0.01),VEGF还与临床分期有关(P<0.05)。乳腺癌中VEGF表达与C-erbB-2表达密切有关(χ2=12.97,P<0.01)。结论 VEGF和C-erbB-2参与了乳腺癌的发生和 发展 过程,VEGF和C-erbB-2可作为临床上判定乳腺癌预后的指标。
【关键词】 乳腺肿瘤;VEGF;C-erbB-2;免疫组织化学
Abstract: Objective To outline the expressions of vascular endothelial groethod en of breast benign lesion tissues. Results 62.50% patients or size and histological classification (Pgt;0.05), and correlated positively ph node metastasis (Plt;0.05 or 0.01), VEGF correlated positively portant role in the oncogenesis and development of breast cancer, VEGF and C-erbB-2 may be markers for clinically predicting the prognosis of breast cancer.
Key ; VEGF; C-erbB-2; immunohistochemistry
乳腺癌是危害妇女健康的常见恶性肿瘤之一,其发病率和病死率均呈较快的增长趋势。乳腺癌与其它肿瘤一样,肿瘤的发生、发展及预后与多种因素有关。本组 研究 应用 免疫组化方法检测80例乳腺癌中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、原癌基因(C-erbB-2)的表达,探讨乳腺癌组织中VEGF和C-erbB-2的表达情况及其与临床病理特征之间的关系。
1 材料与方法
1.1 材料 收集贵港市人民 医院 病理科2003年1月~2005年9月乳腺癌手术根治标本80例。全部患者术前均无放疗、化疗及激素 治疗 史。患者均为女性,年龄26~75岁,平均51.3岁;肿瘤直径1~10cm;腋窝淋巴结转移阳性40例,阴性40例。根据分期标准:Ⅰ期17例,Ⅱ期40例,Ⅲ期23例。另取20例乳腺良性病变组织标本作为对照组(其中乳腺腺病10例,乳腺纤维腺瘤10例)。所有标本均经10%甲醛固定,做4μm连续切片,进行HE及免疫组化染色。
1.2 试剂 即用型VEGF、C-erbB-2单克隆抗体,即用型快捷免疫组化MaxVisionTM试剂盒及DAB显色剂均为福州迈新生物技术公司产品。
1.3 方法 采用快捷免疫组化MaxVisionTM法。严格按照产品的操作说明。具体染色步骤:①石蜡切片脱蜡和水化后,用PBS(pH7.4)冲洗3次,每次3min;②微波抗原修复;③3%H2O2室温下孵育10min,以阻断内源性过氧化物酶的活性,PBS冲洗3次,每次3min,除去PBS液;④分别滴加VEGF、C-erbB-2一抗工作液,室温下孵育60min;⑤PBS冲洗3次,每次5min,除去PBS液,每张切片加1滴即用型MaxVisionTM试剂,室温下孵育15min。PBS冲洗3次,每次3min;⑥除去PBS液,每张切片加2滴新鲜配制的DAB溶液,显微镜下观察5min;⑦自来水冲洗,苏木素复染,自来水冲洗返蓝,梯度酒精脱水干燥,中性树胶封固。用试剂公司提供的VEGF和C-erbB-2阳性的组织切片做阳性对照,以PBS代替一抗做阴性对照。
1.4 结果判断 VEGF以细胞浆或细胞胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性判定标准,C-erbB-2以细胞胞浆中出现棕黄色颗粒为阳性判定标准,无阳性细胞或阳性细胞<10%为(-),阳性细胞≥10%为(+)。
1.5 统计学 分析 应用SPSS10.0统计软件分析,计数资料采用χ2检验。
2 结果
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