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刺五加苷对D半乳糖致衰老模型大鼠免疫功能的影响.doc
刺五加苷对D半乳糖致衰老模型大鼠免疫功能的影响
【摘要】 目的 研究刺五加苷对D半乳糖(Dgal)致衰老模型大鼠免疫功能的影响。方法 以不同浓度刺五加苷作用Dgal致衰老模型大鼠后, 计算 脏器指数,MTT比色法测定T淋巴细胞增殖功能,ELISA法测定白介素2(IL2)、白介素6(IL6)、肿瘤坏死因子α(TNFα)浓度。结果 刺五加苷改善Dgal致衰老大鼠免疫功能具有浓度依赖性。结论 刺五加苷能改善衰老大鼠免疫功能,延缓免疫衰老。
【关键词】 刺五加苷;衰老;白介素2;白介素6;肿瘤坏死因子α
免疫功能下降已成为机体衰老的特征表现之一,引起衰老的因素都会导致免疫系统功能下降,从而发生感染、癌症及自身免疫性疾病等,使正常寿命明显缩短。刺五加药性温和,自古就被视为具有抗衰老作用的良药,汉代《神农本草经》已将它列为无毒、久服可以轻身、延年益寿而无害的上品,苷类是五加属植物的有效生物活性成分。虽然 现代 研究证实,刺五加提取物能调节免疫功能〔1〕,纠正自由基代谢紊乱,抗动脉硬化〔2〕、抗疲劳〔3〕,提高机体对有害剌激的抵抗能力等作用,但未见刺五加苷(CG)对免疫衰老影响方面的报道。本实验通过建立D半乳糖(Dgal)致衰老大鼠模型,研究CG延缓衰老的作用,并从免疫学角度探究其延缓衰老的机制。
1 材料与方法
1.1 材料
CG由湖南九汇现代中药有限公司生产,Dgal由Sigma公司生产,噻唑蓝(MTT)和二甲基亚砜(DMSO)由上海生工生物工程有限公司生产,白介素2(IL2)、IL6、肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒购于北京晶美生物技术有限公司,其他试剂为国产分析纯。
1.2 仪器
DS671型天平(上海寺冈 电子 有限公司);紫外分光光度仪:Beckman640型;高速式离心机(上海医学仪器厂TGL16G型);恒温水浴箱(上海天平仪器厂HA型);XTT比色法测定。
1.3.4 血清IL2、IL6、TNFα浓度的测定
采用ELISA法。
1.4 统计学处理
采用SPSS13.0统计软件,数据以x±s表示,进行单因素方差分析。
2 结 果
2.1 CG对衰老大鼠脏器指数的影响
与对照组相比,模型组胸腺指数存在非常显著意义(P<0.01);与模型组相比,中、高浓度组胸腺指数存在显著意义(P<0.05);不同浓度组间比较,低、高浓度组胸腺指数存在非常显著意义(P<0.01),中、高浓度组胸腺指数存在显著意义(P<0.05);各组大鼠脾指数间不存在显著意义(P>0.05),见表1。表1 各组大鼠免疫器官指数的比较(略)
2.2 CG对大鼠T淋巴细胞增殖功能的影响
对照组光密度值(OD值)为0.192±0.004,模型组OD值为0.134±0.003,低浓度组OD值为0.138±0.003,中浓度组OD值为0.143±0.003,高浓度组OD值为0.151±0.007。与对照组相比,模型组T淋巴细胞增殖功能浓度比较有非常显著差异(P<0.01);与模型组相比,低CG浓度组有显著差异(P<0.05);不同浓度组间比较,高、中浓度组之间作用有非常显著差异(P<0.01)。
2.3 CG对衰老大鼠血清IL2、IL6、TNFα浓度的影响
与对照组相比,模型组IL2、IL6、TNFα浓度具有非常显著意义(P<0.01);与模型组相比,高浓度组IL2、IL6、TNFα浓度具有非常显著意义(P<0.01),中浓度组IL2、TNFα浓度具有非常显著意义(P<0.01),IL6浓度具有显著意义(P<0.05),低浓度组IL2、IL6、TNFα浓度不具有显著意义(P>0.05);不同浓度组间比较,中、高浓度组之间IL2、IL6、TNFα浓度具有非常显著意义(P<0.01),见表2。表2 CG对衰老大鼠血清IL2、IL6、TNFα浓度的影响(略)
3 讨 论
免疫衰老是免疫系统由基因严格控制的衰老过程,免疫衰老始于增龄导致的胸腺萎缩。衰老免疫学说认为,胸腺是免疫系统的中枢器官,其衰退可导致T淋巴细胞减少,免疫杀伤力降低,整体免疫功能下降,导致机体衰老。脾作为机体重要免疫器官,机体的细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫都与脾功能密切相关。本实验结果显示,中、高浓度CG组胸腺指数存在显著意义,表明其可以通过减缓胸腺萎缩改善机体的免疫功能,但由于Dgal衰老模型组大鼠的脾指数和对照组不存在显著意义,因此CG对脾功能的作用有待进一步研究。
T淋巴细胞增殖功能是评价衰老机体细胞功能的指标,衰老时T淋巴细胞增殖功能下降,对细胞刺激因子的刺激应答功能亦下降。延缓衰老的药物可以使机体对
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