毛细管电泳法测定栀子金花丸中黄芩苷的含量.docVIP

　　毛细管电泳法测定栀子金花丸中黄芩苷的含量 作者：杨慧文，王晓可，毋福海 【摘要】 目的 建立栀子金花丸中黄芩苷的含量测定方法。方法 采用未涂层弹性融硅石英毛细管柱(60 cm× 75 μm，有效长度52 cm)，以40 mmol·L-1硼砂溶液(pH9.0)为运行缓冲液;分离电压为12 kV;重力进样10 s(高度15 cm);检测波长为280 nm;以对硝基苯甲酸为内标。结果 黄芩苷质量浓度在7.5～52.5 μg·mL-1范围内具有良好的线性关系(r=0.999 6)，黄芩苷平均回收率为96.7%，RSD值为1.62%(n=6)。结论 该方法专属性强，结果准确可靠、重现性好，可用于栀子金花丸的质量控制。 【关键词】 毛细管电泳法;栀子金花丸;黄芩苷 　　Abstract:Objective To establish the method for the determination of baicalin in Zhizijinhua pills by capillary electrophoresis. Methods The separation ed in an uncoated fused silica capillary of 60 cm×75 μm ID (52 cm effective length).The running buffer mol·L-1 Na2B4O7 buffer solution(pH9.0).The voltage applied ple ). The detection ,and the internal standard L-1(r=0.999 6). The average recovery for baicalin ethod proved to be exclusive,convenient,rapid and ination of Zhizijinhua pills. 　　Key L-1的内标贮备液。 　　2.1.2 对照品贮备液的制备 精密称取在60 ℃减压干燥4 h的黄芩苷对照品15 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液(黄芩苷质量浓度为150 μg·mL-1)。 　　2.1.3 供试品溶液的制备 取栀子金花丸样品，研碎，取约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%(体积分数)甲醇50 mL，称定重量，超声处理40 min，放冷，再称定重量，用70%(体积分数)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液10 mL至蒸发皿中，水浴挥干，再用70%(体积分数)甲醇溶解转移至10 mL量瓶中，加入内标溶液2.5 mL，用70%(体积分数)甲醇稀释至刻度，摇匀，0.45 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。 　　2.1.4 阴性对照液的制备 取处方组成中除黄芩外的其余药材，制成不含黄芩的阴性对照品，按“2.1.3”项下方法处理，即得。 　　2.1.5 运行缓冲液的制备 精密称取硼砂适量，加水制成40 mmol·L-1硼砂溶液(pH=9.0)，0.45 μm微孔滤膜滤过，作为运行缓冲液。 　　2.2 电泳条件 　　采用未涂层弹性融硅石英毛细管柱(60 cm×75 μm，有效长度52 cm);以40 mmol·L-1硼砂溶液(pH9.0)为运行缓冲液;分离电压为12 kV;重力进样10 s(高度15 cm);检测波长为280 nm;温度为室温，湿度小于70%。毛细管柱在使用前依次用0.1 mol·L-1 NaOH溶液和水冲洗15～20 min，再用运行缓冲液冲洗约5 min。以对硝基苯甲酸为内标。在此条件下进行测定，对照品、供试品、阴性对照溶液色谱图见图1。 　　2.3 方法学考察 　　2.3.1 标准曲线的制备 分别吸取对照品贮备液适量，加甲醇稀释成黄芩苷质量浓度为7.5、15.0、22.5、30.0、37.5、45.0、52.5 μg·mL-1，内标物质量浓度为25.0 μg·mL-1的溶液。依次重力进样10 s，每个浓度测定3次以上。以对照品与内标峰面积的比值为纵坐标(Y)，黄芩苷质量浓度(ρ)为横坐标进行线性回归，得回归方程Y=0.0350ρ-0.0383，r=0.999 6。表明黄芩苷在7.5～52.5 μg·mL-1范围内线性关系良好。 　　2.3.2 精密度试验 取质量浓度为30.0 g·mL-1的黄芩苷对照品溶液，按“2.2”项下电泳条件，连续测定5次，记录峰面积并 计算 RSD值。结果黄芩苷峰面积的RSD=1.99%，表明仪器精密度良好。 　　2.3.3 稳定性试验 取供试品溶液(批号090741)，在0、2、4、6、8、12 h分别重力进样10 s，记录峰面积并计算RSD。结果黄芩苷