注射用泮托拉唑钠无菌检查方法学验证.docVIP

　　注射用泮托拉唑钠无菌检查方法学验证 　　摘要:目的:建立注射用泮托拉唑钠的最佳无菌检查方法,保证检验结果的准确和可靠性。方法:按 中国 药典2005年版二部(附录Ⅺ H)无菌检查法中的薄膜过滤法进行。结果:样品管无菌生长,六株阳性对照菌生长良好。结论:方法学验证采用薄膜过滤法进行的无菌检查,可行。 　　关键词:注射用泮托拉唑钠;无菌检查法(薄膜过滤法);方法学验证 　　 　　泮托拉唑钠为第三代质子泵抑制剂,在中性和弱酸性条件下相对稳定,在强酸性条件下迅速活化,其pH依赖的活化特性,使其对H+/K+-ATP酶的作用具有更好的选择性。泮托拉唑钠能特异性地抑制壁细胞顶端膜构成的分泌性微管和胞浆内的管状泡上的H+/K+-ATP酶,引起该酶不可逆性的抑制,从而有效地抑制胃酸的分泌。 　　 　　无菌检查时必须选择适宜的方法消除其对培养基干扰,才能保证检验结果的准确和可靠性。为此我们按照《中国药典》2005年版二部(附录Ⅺ H)无菌检查法项下薄膜过滤法的要求对注射泮托拉唑钠进行了实验,对其无菌检查方法进行验证。 　　1仪器与材料 　　1.1HTY-2000A型智能集菌仪及全封闭式无菌过滤培养器(杭州高得泰林医疗器械有限公司)。 　　1.2 注射用泮托拉唑钠:哈尔滨誉衡药业股份有限公司 080122、080123、080124 规格40mg 　　1.3菌珠:金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003]、铜绿假单胞菌[CMCC(B)10 104]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63 501]、生孢梭菌[CMCC(B)64 941]、白色念珠菌[CMCC(F)98 001]、黑曲霉[CMCC(F)98 003]以上均由中检所提供。 　　1.4培养基及冲洗液:硫乙醇酸盐流体培养基 批号050907、改良马丁培养基 批号060419、营养肉汤培养基批号050919、营养琼脂培养基批号060330、玫瑰红钠琼脂培养基批号070606,0.1%蛋白胨水溶液 批号050711,以上培养基均由中检所提供。 　　2实验方法 　　2.1 菌液制备:按《中国药典》2005年版二部附录Ⅺ H,无菌检查法进行制备。 　 　　2.2 菌液计数:每种菌液接种2个平皿,取其平均值。取金黄色葡萄球菌液、铜绿假单胞菌液、枯草芽孢杆菌液、生孢梭菌液各1ml,注入约15ml营养琼脂平皿,30～35℃培养,白色念珠菌、黑曲霉菌菌液各1ml,注入约15ml玫瑰红钠琼脂培养基23～28℃培养,计数??2.3.方法验证试验:薄膜过滤法(以0.1%无菌蛋白溶液为冲洗液) 　　2.3.1试验组:取供试品120支,分别溶于2瓶0.1%无菌蛋白胨溶液500ml中,每瓶60支,分别置6个滤筒中过滤(每筒20支),滤筒中分别加入已制备好的金黄色葡萄球菌菌液、铜绿假单胞菌菌液、枯草芽孢杆菌菌液、生孢梭菌菌液、白色念珠菌菌液、黑曲霉菌菌液各1ml,约为10～100cfu/筒,依照2005年版《 中国 药典》附录无菌检查法,加入相应的培养基,按规定条件培养3～5天,逐日观察。 　　2.3.2对照组:另取6个滤筒,分别加入1ml相应试验菌,再加入相应的等量培养基,作为对照,按规定条件培养3～5天,逐日观察。 　　2.3.3供试品对照组:取供试品40支,溶于0.1%无菌蛋白胨溶液300ml,分别在2个滤筒中过滤(每筒20支),并在2个滤筒中分别加入硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基,依照2005片版《中国药典》附录无菌检查法,按规定条件培养3～5天,逐日观察。 　　2.3.4阴性对照组:取稀释用0.1%无菌蛋白胨溶液适量,分置两个滤筒中过滤,再分别加入硫乙醇盐培养基和改良马丁培养基,置规定条件培养3～5天,逐日观察。 　　3 实验结果 　　3.1菌液计数:结果见表1 　　结果符合规定。 　　3.2验证试验各组生长情况:结果见表2 　　由表2可知各试验菌生长良好。 　　4 结论: 　　经过三次平均试验,与对照组比较,含供试品的各滤筒中的试验菌均生长良好,并与各对照组中相应菌落生长情况相似,供试品对照组、阴性对照组和空白对照组均无菌落生长,由此说明,注射用泮托拉唑钠在此检验量和检验条件下(冲洗量为500ml)无抑菌作用,因此可按此检查法和检查条件进行注射用泮托拉钠的无菌检查。如含供试品的任一容器中微生物生长微弱、缓慢或不生长,则供试品的该检验量在该检验条件下有抑菌作用,可采用增加冲洗量,或增加培养基的用量,或使用中和剂或灭活剂等方法来消除供试品的抑菌作用,并重新进行方法验证。 　　 　　 参考