第7章微生物的遗传和育种.pptVIP

第七章 微生物的遗传变异和育种( Microbial genetics and breeding );遗传变异的物质基础 基因突变和微生物育种 基因重组和杂交育种 基因工程 菌种的衰退、复壮和保藏;第一节 微生物遗传变异的物质基础 ;遗传物质类型;核基因组：又称染色体基因组或基因组，是一个物种的单倍体细胞核内的全部 DNA分子。 基因：编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列 。;1、 原核生物的基因组; 细菌染色体DNA的大小和结构 ;乳糖操纵子;（1）典型的染色体结构，大，具有许多复制起点； （2）一个基因组包含若干染色体，一般不呈环状； （3）功能上密切相关的基因集中程度不如原核生物，很少有关于操纵子的报道，一般为单顺反子； （4）基因不连续，分外显子和内含子； （5）有大量重复序列，有很多是不编码序列。 ;真核生物细胞中的DNA中只有不到5％的DNA用于所需蛋白质的基因表达，其余的DNA起“结构”作用或“调节”作用。 DNA被紧密地包装在多条染色体中，每条染色体中含有一个线状DNA分子，它以左手螺旋方向围着一个个组蛋白八聚体绕圈1.8周，形成串珠状的染色质，被串在一起的小颗粒称为核小体，染色质进一步卷曲形成每圈6个核小体、直径30 nm的染色质丝，它折叠成许多超螺旋环附着在中央骨架上。;真核生物基因结构;3、基因的命名——三字命名法 （1）基因名称一般用三个小写字母表示，且排成斜体； 例：赖氨酸基因： lysine——lys——Lys （基因） （基因产物） （2）产生同一突变型表型的不同基因，用三个字母后面所加的斜体大写字母表示； 例：组氨酸基因——his; 各组氨酸基因——hisA；hisB （3）抗性基因，一般把“抗”用大写R注在基因符号右上角。如抗链霉素的基因为strR。 ;（二）原核生物的质粒;性质： ①质粒是一种复制子，根据自我复制能力的不同，分为严紧型复制控制和松弛型复制控制两种。 ②在细胞质中独立存在，也可以整合入染色体上，以附加体的形式存在； ③对于细菌的生存并不是必要的。 ④受理化因素影响，可消除。 ;功能：进行细胞间接合，并带有一些基因，如产生毒素、抗药性、固氮、产生酶类、降解功能等。 存在范围：很多细菌等。 制备和鉴定：本质是DNA 应用：基因工程中的载体。;（一） 基因工程中应用的质粒; （1） pBR322质粒;（2）pUC质粒;（1） F质粒; R100;又称大肠杆菌素质粒或产大肠杆菌素因子。 大肠杆菌素是由E.coli的某些菌株所分泌的细菌素，能通过抑制复制、转录、转译或能量代谢等而专一地杀死其它肠道细菌。 大肠杆菌素都是由Col质粒编码的。;;200Kb;T-DNA的染色体整合机制;只在假单胞菌属中发现。 降解性质粒是一系列能降解复杂物质的酶编码，从而能利用一般细菌所难以分解的物质做碳源。 这些质粒以其所分解的底物命名，例如有分解CAM（樟脑）质粒，XYL（二甲苯）质粒，SAL（水杨酸）质粒，MDL（扁桃酸）质粒，NAP（奈）质粒和TOL（甲苯）质粒等。 ; 近年来在根瘤菌属中发现的一种质粒，分子量为200~300×106Da，比一般质粒大几十倍到几百倍，其上有一系列固氮基因。;第二节 基因突变和诱变育种;★按是否容易、迅速地分离到发生突变的细胞来分： 选择性突变株：具有选择标记（如营养缺陷性、抗性突变型、条件致死突变型），只要选择适当的环境条件，如培养基、温度、pH值等，就比较容易检出和分离到。 非选择性突变株：无选择标记（如产量突变型、抗原突变型、形态突变型），检查大量菌落并找出差异。 ;;★依表型的改变分为： 营养缺陷型 抗性突变型 条件致死突变型 形态突变型 抗原突变型 产量突变型;定义：某一细胞在每一世代中发生某一性状突变的几率。;若干细菌某一性状的自发突变率;（三）突变的特点;可诱发性：诱变剂可提高突变率。 稳定性：变异性状稳定可遗传。 可逆性：从原始的野生型基因到变异株的突变称为正向突变，从突变株回到野生型的过程则称为回复突变或回变。;（四）基因突变的自发性和不对应性的证明; 1. 变量试验----统计学原理; ;2.涂布试验---突变率;突变率的计算;3. 平板影印培养试验;A;平板影印培养法;（五）基因突变的机制;1. 诱发突变;（1）碱基置换;;直接引起置换的诱变剂;以亚硝酸为例：使碱基发生氧化脱氨作用。 HNO2 胞嘧啶（C）