RKIP基因启动子甲基化与胃癌侵袭转移及预后的关系.pdfVIP

• 91 8 • 临床与实验病理学杂志 J Clin Exp pω， hol 2014 Aug; 30(8) 网络出版时间:2014 - 8 - 16 09 :01 网络出版地址:hup:ki.neνkcmsldoν10. 133151j. cnki. cjcep. 2014. 08. 022 . html RKIP 基因启动子甲基化与胃癌侵袭转移及预后的关系 李冬霞1 ，千智斌t ，李永真1 ，李巧香2 摘要:目的探讨胃癌组织中 R阳P 基因启动子甲基化情况 1. 82)岁;有淋巴结转移者 62 例，元淋巴结转移者36 例;高 分化腺癌25 例，中分化腺癌36 例，低分化腺癌37 例。 与胃癌生物学行为及其预后的关系。 方法 采用甲基化特 异性PCR( methylation-s严ciíic PCR , MSP) 技术检测98 例胃 1.2 MSP 提取患者基因组 DNA ，经紫外分光光度计检测 癌组织及癌旁正常回黠膜组织中 RKIP 基因启动子甲基化 基因组DNA 含量和纯度(AUI/AZfIJ 1. 8)后经亚硫酸氢制 情况;Kaplan-Meier 法评估胃癌患者术后5 年生存率;COX 修饰，然后纯化回收 -20 c冰箱保存备用。 R阳P 基因启动 子区域的引物参考文献川设计，甲基化引物序列:上游5­ 比例风险模型分析 RKIP 基因启动子甲基化对患者预后的 影响。 结果 胃癌及瘾旁正常胃毅膜组织中 RKIP 基因启 T口AGCGATA1TIγITGAGATACGA-3 ，下游 5-GCTCCCTA- 动子的甲基化阳性率分别为45.9% 和 4. 1% (P O. 05 ) ; ACCTCTAATTAACCG-3 ;非甲基化引物序列:上游 5-π­ TAGTGATA1TIγπGAGATATGA-3 ，下游 5-CACTCCCTA­ RKIP 基因启动子甲基化与胃癌分化程度、UICC 分期及淋巴 结转移有关(P O. 05 ) 0 RKIP 基因启动子甲基化阳性组患 ACCTCTAATTAACCAA-3。 引物序列由大连宝生物公司合 者5 年生存率(20.56% )显著低于阴性组(ω.38%) (P 成。反应总体系为25 怜1 ，反应条件为:95 c预变性 10 min , 0.05) ;RKIP 基因启动子甲基化是胃癌患者的独立预后因 95 c变性 455， 53 c退火 30 s ,72 c延伸 30 s ，4O个循环， 素。 结论 RKIP 基因启动子的异常甲基化与胃癌的发生、 72 C终延伸 10 min。 取5μl 反应产物行2%琼脂糖凝胶电 发展、侵袭、转移有关，其可作为预测胃癌患者预后的生物学 泳，EB 染色后使用凝肢成像分析系统分析电泳结果。 应用 指标。 甲基化引物扩增出大小为204 bp 的产物，键示 RKIP 基因启 关键词:胃肿瘤;民阳P; 甲基化;侵袭;转移;预后 动子甲基化;应用非甲基化引物扩地出大小为205 bp 的片 中图分类号:R 735.2 文献标志码:A 段，提示 R阻P 基因启动子未发生甲基化;既能扩增出大小 文章编号:1 ∞1 -7399(2014)08 -0918 - 03 为204 bp 的产物，又能扩增出大小为 205 bp 的片段，提示为 doi: 10. 13315Ij. cnki . cjcep. 2014 . 08. 022 部分甲基化。 1.3 随访通过门诊及电话方式随访，随访时间自手术后