腹膜腔灌洗对重症急性胰腺炎兔血浆细胞因子的影响.docVIP

　　腹膜腔灌洗对重症急性胰腺炎兔血浆细胞因子的影响 作者：沈新江 冯文明 鲍鹰 朱鸣 【关键词】 腹膜腔 　　重症急性胰腺炎（SAP）早期促炎因子过度释放破坏了促抗炎因子的平衡，造成全身炎症反应综合征（SIRS）［１］，调控细胞因子的生成、降低细胞因子水平成为SAP 治疗 中的重要课题之一。腹膜腔灌洗具有清除中、大分子物质的能力，已有临床运用证实腹膜腔灌洗对SAP有良好的治疗作用［２，３］。作者自2004年7至8月通过腹膜腔灌洗治疗SAP兔，了解其对血浆中的肿瘤坏死因子（TNF-a）及白细胞介素10（IL-10）水平的 影响 。 　　1 材料和 方法 　　1.1 动物及分组 实验动物采用健康新西兰大白兔,重2420～2860g，雌雄不拘，由浙江大学实验动物中心提供。牛磺胆酸钠标准品购于sigma公司。 　　实验兔随机分为3组，SAP非腹膜腔灌洗（NPL）组10只，腹膜腔灌洗（PL）组14只，另取10只作为对照组（C组）。C组和NPL组不进行任何治疗，仅作麻醉后开腹，翻动十二指肠。PL组在建模成功后马上行腹膜腔灌洗治疗2h，腹透液为1.5%的葡萄糖液。 　　1.2 重症急性胰腺炎模型的建立 以兔耳缘静脉注射硫贲妥钠（15mg/kg）麻醉。动物固定后行左颈外静脉置管作采血用，无菌下上腹正中切口进腹，十二指肠升部切开、找到主胰管开口，插入硅胶导管逆行注射5%牛磺胆酸钠液（1ml/kg），持续5min，观察胰腺在10min内出现明显的充血、出血和水肿改变，证实建模成功。小网膜囊内和盆底各置一橡胶管作腹膜腔灌洗用，前者作为腹透液的进路，后者作为出路。 　　1.3 腹膜腔灌洗设备及技术指标 采用百特公司双联系统进行腹膜腔灌洗，先用温生理盐水约30 ml腹腔冲洗，腹透液(15ml/kg)在腹腔内停留1h，腹膜腔灌洗共进行2h。 　　1.4 标本采取 3组均于建模前、建模后1、2、6和24h分别从左颈外静脉置管内采血3ml，在常温下无菌试管内静置30min后，在4℃下1500rpm离心10min，血清于-80℃保存待检。各组观察术后死亡时间。 　　1.5 检测指标及方法 分别用放免法测定各组及时间点的血浆TNF-a和IL-10含量。放免药盒购自解放军总 医院 科技 开发中心放免所，严格按产品说明书操作步骤进行。 　　1.6 统计学方法 实验数据采用均数±标准差（x±s）表示，同一时段组间比较采用F检验和q检验。 　　2 结果 　　3.1 预后 24h内C组无死亡，NPL组有4只死亡（分别死于建模后7、13、16和16.5h），PL组1只死于术后21h。 　　3.2 血浆TNF-a水平 建模后24h NPL组血浆TNF-a升至(827.3±20.8)ng/L,PL组升至 (510.1±29.6) ng/L，C组为(91.7±9.5) ng/L ，NPL和PL组各时点值均高于C组(Plt;0.01)，NPL组各时点的值均比PL组高(Plt;0.01)。见表1。 　　3.3 血浆IL-10水平 建模后2组血浆IL-10均明显升高，建模24h NPL组IL-10升至(357.7±67.2) ng/L,PL组升至(438.8±36.8)ng/L，C组升至(18.4±5.8) ng/L，术后2hPL组、NPL组水平明显高于C组(Plt;0.01)，NPL组建模2h后的IL-10水平明显低于PL组（Plt;0.05～0.01）。见表2。 　　3.4 IL-10/TNF-a的比值 建模后2h NPL组IL-10/TNF-a的比值为(0.4509±0.0900)、24h为(0.4402±0.1094), 建模后2h PL组IL-10/TNF-a的比值为(1.1482±0.2257)、24h为(0.8621±0.0810),C组2h IL-10/TNF-a的比值为(0.2048±0.0417)、24h为(0.2003±0.0378)，手术2h后PL组各时段的比值均高于C组(Plt;0.01)，手术6hNPL组的比值高于C组(Plt;0.01)，建模2h后 NPL组各时点的比值均明显小于PL组(Plt;0.05～0.01)。见表3。 　　表1 3组各时段血浆TNF-a水平（略） 　　注: #q检验 PL组 vs NPL组Plt;0.01，*PL组 vs C组Plt;0.01，ΔNPL组vsC组 Plt;0.01 　　表2 3组各时段血浆IL-10水平（略） 　　注:q检验 PL组 vs NPL组Plt;0.01，*PL组 vs C组Plt;0.01，ΔNPL组 vs C组Plt;0.01 　　表3 3组各时段血浆IL-10/TNF-a水平（略） 　　注:#q检验 PL组 vs NPL组Plt;0.01，*PL组 vs C组Plt;0.01，ΔNPL组