饱及硫酸铵溶液的配制.docVIP

饱和硫酸铵溶液的配制 ①在25下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每升溶液所加固体硫酸铵的克数。1．?2．?调整硫酸铵溶液饱和度计算表（0） ①在0下，硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时，每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。25℃下100%硫酸铵是1L水中约加780g硫酸铵。可以加进去之后，用微波炉加热到溶解为止，然后放置在过夜，第二天就会有晶体析出，这就可以了双蒸水中加入过量硫酸铵，热至50－60度保温数分钟，趁热滤出沉淀，在0度或25度平衡1－2天，有固体析出时即达100％饱和度，以氨水调节PH值至7.0。 硫酸铵在水中的溶解度，100度时为1.034g/ml，0度时为0.706g/ml 。因此，每100ml蒸馏水加90gAR级结晶硫酸铵，80度溶解，趁热过滤，降至室温后即有结晶析出，应任其留存瓶中，使用前吸出所需的量，用28%的调PH至7.2即可。结晶要留着，随着温度变化，溶解度也会变化，你总要保证溶液中是饱和的，所以结晶留在瓶底，不需要再过滤，使用时取上面的溶液即可。pH7.0或7.2影响不大，也有调到7.4的，因为最后沉淀的蛋白一般都是用PBS稀释的。 最方便的就是500ml水加半瓶250g硫酸铵剧烈搅拌，上层澄清的就是饱和的了。 另外较快达到饱和状态的方法是，将过量的硫酸铵（参考不同温度下的溶解大多数，或干脆多加点）放在水浴箱内高温溶解，取出致室温放置至其平衡（会有硫酸铵重新析出），上清即为室温下的饱和硫酸铵 先将硫酸氨80克溶解到100水中，加热到80左右，溶解部分过滤，其余的再溶，仍有一部分结晶，过滤的溶液当降到室温的时候就会有结晶，平衡一两天，取上清用同时氨水调节PH值用。 硫酸铵沉淀主要分为两种形式： 1.将事先配好的饱和硫酸铵溶液加入目标溶液中，这种方法精确度高，硫酸铵是弱酸性的，事先调好pH后，再补入溶液中pH变化小，适合于对pH敏感的蛋白（酶类）或要求比较高的实验。 2.直接将固体硫酸铵补入目标溶液中，这种方法比较快速，但是加入后溶液pH值会有一定程度的降低，适合于对pH不敏感的蛋白，这种操作应该能满足一般实验的要求。