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霉菌–生长速率法
实验十 杀菌剂的生物测定--生长速率法 * * 一、实验目的 学习并掌握杀菌剂的生物测定方法之一--生长速率法 二、实验原理 生长速率法是杀菌剂毒力测定的常规方法之一,适用于不长孢子而菌丝生长较快的真菌,是通过菌落生长的速度快慢来衡量药剂的毒力大小 生长速率法又叫含毒介质法,它是将供试药剂与培养基混合,以培养基上菌落的生长速度来衡量化合物的毒力大小。一般多用于那些不产孢子或孢子量少而菌丝较密的真菌 菌落生长速率的表示方法 菌落达到一个给定的大小所需要的时间(天或小时) 在单位时间内菌落直径的大小 生长速率法常用的菌种 棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporium) 苹果腐烂病菌(Valsa mali) 小麦纹枯病菌(Rhzoctonia solani ) 葡萄白腐病菌(Coniothyrium diplodiella) 小麦全蚀病菌(Gaeumannomyces graminis) 辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici) 三、试剂和仪器设备 高压灭菌锅、超净工作台、酒精灯、接种针、纱布、吸管、消毒培养皿、打孔器、无菌小烧杯 PDA培养基 病原菌(苹果腐烂病菌) 供试杀菌剂(多菌灵) 四、实验步骤 将培养基加热溶化,冷却至45-50℃,加入供试药液制成含药液的培养基,并分别倒入培养皿中冷却 以无菌操作手续,用打孔器打取圆形菌块后用接种针挑至培养皿中央,然后将培养皿置于培养箱(27℃)中培养即可 于处理后不同时间观察测定菌丝的生长情况 五、实验数据及其处理 纯生长量=菌落平均直径-菌饼直径 抑菌率(%)=[(对照菌落纯生长量-处理菌落纯生长量/对照纯生长量]×100% 平均 Ⅳ Ⅲ Ⅱ Ⅰ 机 率 值 抑制(%) 菌落直径(mm) 浓度对数 浓度(mg/L) 药剂 50%多菌灵对苹果腐烂病菌的抑制作用(生长速率法) *
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