活化星形胶质细胞NGF、IL-6表达的时间特性.pdfVIP

HD Huntingtons Disease 亨廷顿舞蹈病 ICH Intracerebral hemorrhage 脑出血 IL-1 β interleukine-1 β 白介素-1 β IgG Immunoglobulin G 免疫球蛋白G IL-6 Interleukin-6 白细胞介素-6 mRNA Messenger RNA 信使RNA NGF nerve growth factor 神经生长因子 NO nitric oxide 一氧化氮 OD Optical density 光密度 PBS Phosphate Buffered Saline 磷酸盐缓冲液 PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链式反应 PGE2 prostaglandin E2 前列腺素E2 RNA Ribonucleic Acid 核糖核酸 RT-PCR reverse transcription polymerase 逆转录聚合酶链反应 TNF-α tumor necrosis factor-α 肿瘤坏死因子-α VEGF vascular endothelial growth factor 血管内皮生长因子 2 万方数据 活化星形胶质细胞NGF 、IL-6 表达的时间特性 中文摘要 目的: 研究星形胶质细胞活化后神经生长因子(nerve growth factor,NGF) 、白细胞 介素-6(interleukin-6, IL-6)两种不同作用因子表达的时间规律性，探讨星形胶质细胞活 化后启动保护性机制与损伤性机制的时间特性。 方法：体外培养星形胶质细胞，将分离纯化的星形胶质细胞分为对照组、活化组、 抑制组：将常规用含10%FBS 的DMEM （高糖）培养基培养24h 后的星形胶质细胞 作为对照组细胞，用加入睫状神经营养因子(Ciliary neurotrophic factor ,CNTF) （20ng/ml ）、10%FBS 的DMEM （高糖）培养基培养24h 后的星形胶质细胞作为活 化组细胞，将加入Genistein （30μmol/L ）、10%FBS 的DMEM （高糖）培养基作用 于活化组细胞再培养24h 后的细胞作为抑制组细胞。通过光学显微镜及免疫荧光化学 观察各组细胞的形态变化；应用半定量RT-PCR 方法分析各组细胞间胶原纤维酸性蛋 白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)mRNA 及NGF mRNA 、IL-6 mRNA 表达变化； 用ELISA 法检测各组星形胶质细胞上清液中不同时间点（6h，24h，48h，72h ）NGF 、 IL-6 的含量。 结果：活化组与对照组比较，星形胶质细胞胞体变大，数量增多，突起变长增多， 呈网状交织；RT-PCR 示GFAP mRNA 表达增高，NGF mRNA 、IL-6 mRNA 表达亦 明显增高，与对