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聚合酶操作手册试剂盒包装体系模板上游引物下游引物聚合酶无菌蒸馏水至扩增短片段和长片段的循环条件的循环条件温度时间循环数预变性变性退火延伸最后延伸保存注的片段延伸已足够的循环条件温度时间循环数预变性变性退火延伸变性退火延伸最后延伸保存条件的优化为扩增特异的目的片段必须在适当的范围内调整各个反应组份的浓度时间温度等参数以实现对特定片段的高效扩增模板为扩增长片段目的片段必须使用高质量的完整的高纯度的模板引物反应的引物是寡核苷酸一般长度为个碱基它们与相应的链杂交后引导底物与其侧面的目的片段杂交建议引物的
V-Taq DNA聚合酶
操作手册
试剂盒包装μl) 500units 10×PCR buffer (20mM Mg2+) 1.5ml 10×PCR Buffer：
μl体系）：
DNA模板 1pg-1μg
上游引物 5-10pmole
下游引物 5-10pmole
V-Taq DNA聚合酶（5U/μl） 0.25-0.5μl
10×PCR buffer 2μl
dNTPs（2.5mM each） 2μl
无菌蒸馏水 至20μl
扩增短片段和长片段的循环条件
10kb的循环条件 温度 时间 循环数 预变性 92-94℃ 2-4
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