临床PCR检验标本的处理、保存及核酸提.pptVIP

靶核酸提取的质量 纯化的靶核酸的完整性：可使用凝胶电泳将样本的核酸提取物与一核酸标准比较测定。 核酸提取的产率：可在A260读数测定。 核酸纯度：可通过提取物A260/A280比率判定 血清或血浆中病原体核酸纯化纯度：采用一种间接的方法，即使用已知病原体含量的溶血和/或脂血标本用待评价试剂提取，然后进行扩增检测，比较所得到的结果 * 临床标本核酸提取中可能存在的非源自标本的抑制和干扰物质 核酸提取中：许多试剂如乙二胺四乙酸(EDTA)、去垢剂如十二烷基硫酸盐(SDS)和chaotrope试剂如异硫氰酸胍和盐酸胍等、酚、氯仿、乙醇等有机溶剂 。 * 核酸样本制备及扩增检测的质控 对临床标本中可能存在的抑制/干扰物的质控措施 核酸提取及扩增有效性的质控 * 对临床标本中可能存在的抑制/干扰物的质控措施 质控措施： 采用内质控（internal control, IC）（通常称为内标）的方法 内标有两种,即竞争性的和非竞争性的内标。 * 谢谢！ * 乳汁中布鲁菌DNA的提取 试剂准备 ①NET缓冲液: 50mmol/L NaCl, 125mmol/L EDTA, 50mmol/L Tris-HCl [pH7.6]; ②24%十二烷基硫酸钠（SDS）; ③蛋白酶K; ④RNase。 * * 乳汁中分枝杆菌DNA的提取 试剂准备 ①裂解液：50 m