2015—2016学年人教版选修一微生物的实验室培养课件（31张）.ppt

本课题知识小结: * * 专题2 :微生物的培养与应用 19世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一 度遭受毁灭性的打击。在生产过程中， 出现了葡 萄酒变酸、变味的怪事。经过一番研究，法国科 学家巴斯德发现导致生产失败的根源在于发酵 物中混入了杂菌。 由此人们意识到保持培养物纯 净的重要性。 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物， 是研究和应 用微生物的前提。一方面需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件，另一方面需要确保无 处不在的其他微生物无法混入。 一、基础知识： （一）培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 按物理状态分：液体培养基和固体培养基。 1.培养基的类型 在液体培养基加入凝固剂琼脂后，制成固体培养基。 你想知道固体培养基的来历吗？请点击人教网查询 固体培养基 液体培养基 2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方。（参考课本P83 附录3） 3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质。 讨论1：回忆有关活细胞中元素组成的知识，想一想为什么大多数培养基都含有这四类物质？ 1000mL牛肉膏蛋白胨固体培养基配方 培养基组分 提供的主要营养 牛肉膏 5.0g 碳源、氮源、磷酸盐和维生素 蛋白胨 10.0g 氮源和维生素 NaCl 5.0g 无机盐 H2O 定容至1000ml 氢元素、氧元素 除此之外，还需要满足微生物生长对特殊营养物质（例如:生长因子，即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物，如维生素、某些氨基酸等） pH以及氧气等要求。 二、无菌技术 1.无菌技术 （1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 （2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 （3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 （4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 无菌技术，主要包括以下几个方面： 消毒：指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分的微生物（不包括芽孢和孢子）。 2.消毒与灭菌 灭菌：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而达到完全无菌的过程。 提示：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 讨论2：无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。 细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。 煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 化学药剂消毒法:用70%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源 紫外线消毒 (1)消毒的方法： 3.常用的消毒与灭菌的方法 1、灼烧灭菌 (2)灭菌的方法： 2、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。主要对能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金属用具等进行灭菌。 3、高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min。 讨论3：请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 提示：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 三、实验操作 1.制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 1．计算 2． 称量 3．溶化　 4．灭菌 5．倒平板 操作步骤 倒平板技术 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可