2016-2017学年人教版选修1多聚酶链式反应扩增DNA片段学案.doc

高二生物 导学案 执笔： 审核： 审批： 学案编号： 授课人： 授课时间： 姓名： 班级： 小组： 课题 课题2多聚链式反应扩增DNA片段 课型 新授 课时 1 教师复备栏（学生笔记） 【学习目标】站得高——明确学习目标 （一）知识与技能：1、了解PCR技术的基本操作 2、理解PCR的原理 3、讨论PCR的应用 （二）过程与方法：在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件 （三）情感、态度与价值观：通过对PCR实验的操作及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神 【学习重点和难点】重点：PCR的原理和PCR的基本操作 难点：PCR的原理 【学法指导】启发式教学，拓展视野，感受科学技术的重要价值。。 【知识链接】复习旧知，以旧带新 1、固定化技术中常用的载体有 、 、 、 和 等。 2、DNA析出时，最适宜的盐浓度是 。 3、固定化技术包括 法、 法和 法。 4、、果胶酶的种类包括 酶、 酶和 酶等。 5、粗提取的DNA，在 的条件下，用 检验，被当成 。 【学习内容】 自主学习：起步稳——夯实基础促发展 学生阅读教材P58—63,完成下列学案 （一）、基础知识 一、PCR原理： 1、在用PCR扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内 类似。细胞内参与DNA复制的组成成分有① 、② 、③4 种 、 ④ 酶、⑤引物。它们的作用依次是① 双链、②提供 、③ 的原料、④ 、 ⑤使DNA聚合酶能够从引物 端开始连接 。 2、DNA的两条链是 的，为了明确地表示 DNA的方向，通常将DNA的羟基端（ ）称为 端，而磷酸基团的末端称为 端。DNA聚合酶不能从 开始合成DNA，而能从 延伸DNA链，因此，DNA复制需要 。当引物与DNA母链通过 结合后，DNA聚合酶就能从引物的　　　　　开始延伸　　　　　，因此DNA的合成方向总是从子链的　　　　　　向　　　　　延伸。 3、在DNA的复制过程中，进行DNA复制的前提是 。这个过程可以通过控制 来实现。在80-100℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构 将 ，双链 ，这个过程叫做 。当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新 成双链。这叫做DNA的 ， 4、PCR利用了DNA的 原理，通过控制 来控制双链的解聚与结合。PCR 反应需要在一定的 中才能进行，需提供： 、 分别与两条模板链相结合的两种 ，四种 ，耐热的 酶，同时通过控制 使DNA复制在 反复进行。 二、PCR的反应过程： PCR一般要经历 多次循环，每次循环可以分为 、 和 三步。在循环之前常要进行一次 ，以便增大分子模板DNA 的概率。从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为 与反应，并且由 延伸而成的DNA单链会与 结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶只能特异地复制处于两个 之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。 （二）实验操作：在PCR实验中通常要用到 ，它是一种薄壁塑料管，总容积为 。具体操作时，用 器，按照书中旁栏的配方在微量离心管中依次加入各组分，再参照书中表格设计好PCR仪的循环程序就可以了。 （三）操作提示： 1、为避免外