放射免疫分.pptVIP

结合剂：保存不当是使结合剂质量下降的主要原因，因此“不能反复冻融；一旦稀释，一次性使用” 分离剂：足量以供在一定时期内连续使用，如需更换，必须鉴定，因即使是同一厂家同一批次其性能也可有所差别 * 4.生物样品的采集与制备 生物样品的采集应注意以下几点： 体位：例：对血浆肾素活性测定的影响 饮食：例：对基础胰岛素水平的影响 时间：例：昼夜对对皮质醇和ACTH的影响 机体状态：例：应激对皮质醇和ACTH的影响 性别.年龄.月经周期：例：对性激素水平的影响 药物：例：氢氯塞嗪对血清醛固酮的影响 * 生物样品的制备: 目的:适于检测方法的需要而同时保存 分析物在在生物样品中的本来面目而不出现可以影响检测结果的任何变化 例如：是否需要抗凝？用何种抗凝剂？不能马上检测是否需要离心？保存的温度如何？避免溶血！等等！ * 5. 操 作 操作技术不熟练是产生随机误差的主要原因，其中加样环节尤其重要!加样速度是否均一，移液枪的使用是否规范？所用容器等是否清洁或受到污染？离心的时间、速度、分离剂的量、离心后至分离上清液的时间、吸取上清液的技巧等等 * 6. 数 据 处 理 关于标准曲线拟合方式的选择: 虽然其目的是最佳反映出剂量和效应的关系，但目前没有任何一种拟合方式能最佳的满足所有的检测系统，因此，需要去选择！ * Logit Y=a+b·log X 优点：常用、计算简单、使用方便 缺点：有一定的偏离，特别是线性两端 3/2次方曲线回归或 logit Y=a+b·logX +c（logX）2 +d （logX）3 优点：真实性强 缺点：计算复杂，不易发现并舍弃坏点 WHO 推荐四参数logistic法 其适应性强，但计算复杂 * 但目前的放射免疫分析系统自带的软件 能够对拟合方式作出最佳的选择！ * 7.解释和评价 单位的统一：最好使用国际制单位并统一起来 正常值及正常范围:各实验室应该建立自己的正常值及正常范围，借用文献或以往的数据不可取，因为抽样群体的差别和检测技术的不同，都可能会影响到正常值及正常范围 。建立自己的正常值和正常范围时也应注意两点：1受检人群是否健康 2 受检人群样本含量大小 * 内部质量控制 主要是探讨体外放射分析过程中对实验质量的控制，它包括从采集生物样品到发出检测报告的全过程，及时发现误差，找出引起误差的原因和改正的办法，保证检测的质量，而对试剂盒的评价是十分重要的内容 * 评价试剂盒质量的基本准则： 精密度: 指同一样品在多次重复测定中所得结果的一致程度，反映随机误差。反应精密度的指标有变异系数/反应误差关系/精密度图 准确度: 指测定值与真值或标示值在数量上的符合程度，反映系统误差。常用回收率来表示 特异性: 指不受干扰物质影响测定结果的程度，反映对分析物测定的专一性。通过交叉反应率测定来表示 * 灵敏度： 指刚能与不含有标准配体的零标准管的测定结果在在统计学上区别开来的配体的最低浓度。一般采用最低可探测浓度来表示 有效性：又称健全性，指试剂盒能够达到实验的某一具体目标的有效程度，因此应有其正常值和正常范围，正常与异常之间有良好的界限。健全性实验对于评价检测结果不可或缺 * 稳定性： 指试剂盒在合理的保存条件下，在规定的时间内能保持其全部原有性能不变的能力，常用的质量指标有零标准试管结合率（B0%）/非特异结合率（NSB%）/经直线化后的标准曲线的截距/斜率/及相关系数或者有效剂量浓度（ED75/ED50/ED25）/质控样品的质控图表等 * 但在日常的常规工作中，每测一批样品要进行如此众多的质量指标的计算，实际上是难以做到的！为此，需要拟订能够在日常工作中完成的/又能反应检测质量的方案，这种方案分为两种类型：实验室批内监测和实验室批间监测 * 实验室批内监测方案 推荐以下十项指标： ⑴零标准管结合率（B0%） ⑵非特异性结合率（NSB%） ⑶反应误差关系（RER） * ⑷当标准曲线应用双对数转换并经线性回归获得方程Y=a+bX时，选用截距（a），斜率（b），相关系数（r）及有效剂量浓度值50（ED50）等四个指标，以反应标准曲线的质量 ⑸应用质量控制样品测得值求出标准差及偏差值；精密度图在允许的变异系数限度下（如10%），所包括的标准剂量浓度点数 * 实验室批间监测方案 批间监测的基础是每批检测的质量，着重是观察检测的稳定性，并从相关指标的分析中，及时发现发生误差的原因，并提供消除的方法，以保证检测