泼尼松龙诱导斑马鱼骨质疏松模型的建立.pdf

世界科学技术— 中医药现代化★中药研究 泼尼松龙诱导斑马鱼骨质疏松模型的建立＊ □王长梅 韦英杰＊＊ 贾晓斌＊＊ （江苏大学药学院 镇江 212013） （江苏省中医药研究院/ 国家中医药管理局中药口服释药系统重点研究室 南京 210028） 蔡雪婷 孙 娥 宋 捷 （江苏省中医药研究院/ 国家中医药管理局中药口服释药系统重点研究室 南京 210028） 摘 要：本 文首次采 用斑马鱼 为模型 动物 ，以糖皮质 激素泼尼松龙 为造模用药，建 立一种 快速 、 高效 的骨质疏松新动物模型 。选 用受精后 4 d 或 5 d 的幼鱼暴露于不 同浓度泼尼松龙溶液 中，同时 设 0.5%DMSO 溶媒阴性对 照组 ，28.5 ℃ 下在 24 孔板 中培养 5 d ，至斑马鱼颅 骨形成 。采 用茜素红对培 养至 9 d 或 10 d 的斑马鱼 骨骼进行染色 ，以显微检测 、数码 成像方 法定量分析 骨骼染色区域 。与溶 媒阴 性对 照组相比 ，2.5 ，10，25 μmol ·L-1 泼尼松龙组 的斑马鱼 骨骼染色面积和 染色光密度值显 著减 少，提示泼尼松龙使 斑马鱼 骨骼矿化量和 骨密度显著 降低 ，成功诱 导斑马鱼骨质疏松 。并 用该模型 成 功验证鲑 鱼 降钙素和依替膦 酸二钠 防治骨质疏松 的作用。 关键词：斑马鱼 泼尼松龙 骨质疏松 鲑鱼降钙素 依替膦 酸二钠 doi: 10.11842/wst.2013.03.028 中图分类号：R274 文献标识码 ：A [1~4] 骨质疏松症是一种以骨量减少、骨组织显微结 效率低 ；现有细胞模型作用环节单一，成本高，原 构异常和骨折危险性增加为特征的一类病征，由于 代培养难度大，一般的实验室不能进行。二是化合 西药存在长期应用副作用大等缺陷，中药治疗骨质 物的数量问题。 由于中药成分复杂，很难分离到能 疏松的功效正日益受到重视。但壮骨中药及其成分 满足体内研究的足量化合物，大量的量微成分只能 特别是量微成分的活性评价却不能高效进行，主要 通过细胞模型进行筛选。因此，现有骨质疏松模型 存在两个瓶颈问题：一是模型问题。现有动物骨质 难以实现对壮骨中药及其成分的高效、灵敏、高通 疏松模型耗时长，用样量大，劳动强度大，活性筛选 量的筛选。建立具有体内、外优势，可用于量微成分 壮骨效应评价的骨质疏松新模型具有重要意义。 收稿日期：2012-08-26 斑马鱼是近年来被广泛用于建立疾病模型和 修回日期：2012-09-14 ＊ 江苏省科学技术厅自然科学基金项目（BK2011866）：模式生物斑马鱼壮骨效应评价模型的建 立与应 用研究，负责人：韦英杰；国家 自然基金 委面上 项目 ：基 于模 式生物斑马鱼模型的中药代谢研究新方 法的建立 ，负责人：韦英杰 ； 国家 自然科学基金委面 上 项目 ：基 于体 内自组装胶束形成机制 的羊脂油炙淫羊藿增效机理研究，负责人：贾晓斌。 ＊＊ 通讯作者：韦英杰，副研究 员，主要研究方向：中药物质基础与质量控制 ；贾晓斌，研究员，主要研究方向：方剂物质基础与现代 中药制剂创新研 究以及中药 ADME/Tox 技术平台及其在 中药研究中应用。 〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica 〕 509 2013 第十五卷 第三期 ★Vol.15 No.3 [5~7] 药物发现的重要模式生物 ，其在骨骼方面的研究