天然药物化学实验课程教案剖析.docx

武汉生物工程学院天然药物化学实验课程教案课程基本信息授课时间 2015年3月8日-2015年7月3日教案编写时间 2015年2月28日课程名称天然药物化学实验课程代码总学时 32 讲课：学时实验：32 学时实习：周学分2课程性质必修课（√）选修课（）理论课（）实验课（√）任课教师职称授课对象专业：制药工程年级： 2012级班级： 2012本科教材及主要参考资料教材：自编参考资料：天然药物化学实验中国医药科技出版社杨月主编（2010）天然药物化学实验与指导中国医药科技出版社梁敬钰主编（2011）天然药物化学实验中国医药科技出版社　　李嘉蓉主编（2010）教学目的和教学要求1、重点掌握中药中各类成分的提取分离、化学鉴定和薄层检视的基本理论和基本方法。2、熟悉中药所含有效成分的结构鉴定方法。3、进一步掌握理论所学到的知识。教学重点和难点1、各种有效成分结构类型、理化性质。2、提取分离、鉴定的方法。3、各类成分提取时的注意事项。章节备课实验内容不分先后蒽醌类成分的提取分离与鉴别一、教学目的和要求学习羟基蒽醌类化合物的提取分离和检识，通过实验要求：1．掌握从大黄中提取和分离游离蒽醌的方法。2．掌握用pH梯度萃取法分离不同酸性的羟基蒽醌类化合物。3．掌握蒽醌类化合物的主要检识方法。4．熟悉蒽醌类化合物的色谱检识方法。二、教学重点和难点重点：蒽醌类物质的基本性质难点：pH梯度萃取法的原理和适用性三、实验方法和原理本实验是根据大黄中的羟基蒽醌苷经酸水解成游离羟基蒽醌，而游离羟基蒽醌不溶于水，可溶于氯仿、乙醚等亲脂性有机溶剂的性质，用氯仿从水解液中将游离羟基蒽醌提取出来，再利用各游离羟基蒽醌的酸性不同，采用pH梯度萃取法将其分离。其中大黄酚和大黄素甲醚的酸性十分近似，用pH梯度萃取法难以分离，可利用两者的极性不同，采用硅胶柱色谱法进行分离。大黄为蓼科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim. ex Reg.和药用大黄Rheum officinale Baill.的干燥根及根茎。大黄中含有大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚及其苷，总含量约3％～5％。1．大黄酸(rhein) 分子式C15H8O6，分子量284.21。黄色针状结晶（升华法），mp.321～322℃，330℃分解。能溶于碱水、吡啶，略溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚，几不溶于水。2．大黄素(emodin) 分子式C15H10O5，分子量270.23。橙色针状结晶(乙醇)，mp.256～257℃，能升华。易溶于乙醇、碱水，微溶于乙醚、氯仿，几不溶于水。3．芦荟大黄素(aloe-emodin) 分子式C16H10O5，分子量270.23。橙色针状结晶（甲苯），mp.223～224℃。易溶于热乙醇，可溶于乙醚和苯，并呈黄色；溶于碱液呈红色；氨水及硫酸中呈绯红色。4．大黄酚(chrysophanol) 分子式C15H10O4，分子量254.23。橙黄色六方形或单斜结晶（乙醇或苯），mp.196～197℃，能升华。易溶于沸乙醇，可溶于丙酮、氯仿、苯、乙醚和冰醋酸，极微溶于石油醚、冷乙醇，几不溶于水。大黄酚 R1=CH3 R2=H大黄素 R1=CH3 R2=OH大黄酸 R1=COOH R2=H大黄素甲醚 R1=CH3 R2=OCH3芦荟大黄素 R1=CH2OH R2=H5．大黄素甲醚(physcion) 分子式C16H12O5，分子量284.26。砖红色单斜针状结晶，mp.203～207℃，溶于苯、氯仿、吡啶及甲苯，微溶于醋酸及醋酸乙酯，不溶于甲醇、乙醇、乙醚和丙酮。四、实验仪器和材料仪器：烧杯，研钵，玻棒，滤纸，棉花，纱布，布氏漏斗，分液漏斗，烧瓶，冷凝管，铁架台，铁圈，双紧丝，烧瓶夹，显色剂喷瓶，薄层层析缸，硅胶GF254薄层板，电炉，水浴锅，循环水真空泵，紫外灯等。。材料：大黄，硫酸，二氯甲烷，盐酸，缓冲液（pH8、pH10），碳酸氢钠，氢氧化钾，醋酸镁，石油醚，乙酸乙酯，硅胶GF254，CMC-Na，大黄酸标准品，大黄素标准品，芦荟大黄素标准品，大黄素甲醚标准品，大黄酚标准品等。五、实验内容（一）大黄中游离蒽醌的提取（1）水解：称取大黄粗粉50g，置于500mL圆底烧瓶中加20%硫酸溶液100ml直火回流40min，冷却后减压滤过，弃去滤液。（2）萃取：将滤渣于60℃低温干燥30min，置于干燥500mL圆底烧瓶中加入二氯甲烷200mL，40℃水浴回流40min，放冷，用干燥滤器减压滤过。（二）PH梯度萃取法分离游离蒽醌1．大黄酸的分离将氯仿提取液置500ml分液漏斗中，加pH8缓冲液200ml充分振摇，静置至彻底分层，分出碱水层置250m