《植物生理学》实验3 气孔运动及其影响因素.pptVIP

上次试验总结 拭干叶表水分 避开叶脉打叶圆片 移液管取溶液和纯水 溶液要上下颠倒混匀 润洗移液管和针头（放回原液） 叶圆片浸入液面下（玻璃棒洗干） 浸泡30分钟后再加甲烯蓝 尽量少加甲烯蓝 桌面上静态操作 实验3 气孔运动及其影响因素 气孔密度测定 K+对气孔开度的影响 背景知识 实验目的 实验原理 实验材料与设备 实验步骤 数据记录与处理 结果比较分析 注意事项 思考题 扩散水的速率：气孔相同面积的自由水面 叶面积：气孔/叶面积＝1-2 / 100 蒸腾量：气孔/相同于叶面积的自由水面 80-100 小孔扩散律： 1 、水分从大表面上蒸发时，蒸发速率与表面积成正比 2 、水分从很小表面上蒸发时，蒸发速率与表面周长成正比 3 、叶片上众多气孔增加了扩散水分的总的周长 5气孔运动 保卫细胞吸水膨胀－气孔口张开 保卫细胞失水收缩－气孔口关闭 保卫细胞运动的结构基础 1 （肾型）外壁薄，内壁厚 2 壁中存在径向排列的微纤丝 微纤丝 难以伸长。以气孔口为中心，限制了保卫细胞沿短轴方向直径的扩大 吸水后，作用于外壁上的压力通过微纤丝传到内壁，成为作用于内壁、背离气孔口方向的拉力 K+积累学说 光下，保卫细胞中的叶绿体通过光合磷酸化生成ATP，ATP驱动质膜上的K+-H+泵，使保卫细胞能逆浓度梯度从周围表皮细胞吸收钾离子，或从外界溶液中吸收钾离子，从而降低其渗透势，促进保卫细胞吸水，气孔开放。 Na+可以代替K+，使气孔开放，但效果如何？ 1 实验目的 1.1 了解不同材料中气孔在叶片上的分布特点，掌握测定气孔大小的方法； 1.2 熟悉气孔运动的调节机理，能够独立分析化学物质及环境因素对气孔运动的影响程度 。 2 实验原理 气孔状态 气孔大小 2.1 印迹法 以有机物质的溶胶涂在植物的表面，胶体风干后就凝成薄膜，这层膜就印有表皮组织各细胞的界迹边痕。 除用来观察气孔状况外，还可用于观测植物表皮上的细胞、茸毛以及蜜腺、蜜盘、刺鳞片等。 2.2 固定法 无水酒精能是植物细胞迅速脱水死亡，因而细胞壁硬化、细胞形状固定，气孔也得以保持原样，有利于以后镜检研究，植物材料还可长期保存。 2.3 气孔密度的测定 气孔密度：单位面积上气孔的数目 显微镜视野面积内观测到的气孔数 显微镜视野面积：S=πr2，r可用目镜测微尺量取 目尺标定： 目镜测微尺刻度的大小是随放大倍数而不同的 物镜测微尺1 mm分成100等分， 即每一刻度10 μm（实际长度，不受放大倍数影响） 2.4 K+对气孔开放的影响 光下，保卫细胞中的叶绿体通过光合磷酸化生成ATP，ATP驱动质膜上的K+-H+泵，使保卫细胞能逆浓度梯度从周围表皮细胞吸收钾离子，或从外界溶液中吸收钾离子，从而降低其渗透势，促进保卫细胞吸水，气孔开放。 Na+可以代替K+，使气孔开放，但效果如何？ 3 材 料 蚕豆或菠菜叶片 印迹法 固定法 气孔开度的影响因素 显微镜（物尺、目尺） 4 实验步骤 4.1 固定法定性观察 用镊子撕剥下叶子的表皮（用刀片切一小口以利于撕取），迅速（愈快愈好）放入无水乙醇中固定2～3 min， 把固定好的表皮放在载玻片上，加几滴无水乙醇，压上盖玻片，即可镜检，观察测量气孔开闭情况等。 4.2 印迹法定性观察 将火棉胶（50℃）涂抹于叶面成一薄层，自然风干2 min， 用镊子取下干膜，在稍有湿润的载玻片上此膜就能粘贴牢固，即可镜检（长期保存）。要在干燥条件下加盖玻片封固 4.3 气孔定量观察 气孔密度 气孔大小 4.4 定量观察气孔开度 3个皿中分别放KNO3、Na NO3和水各15 ml 每个皿放2~3 张叶表皮 光照处理30 min （25℃） 目尺标定 观察测量气孔开度 5 结果记录、计算 5.1气孔密度 气孔数目、视野直径 5.2 气孔大小和开度 气孔开度（保卫细胞内壁间距离） 气孔密度测定 取3个视野，观察气孔数，取平均值 a 若视野直径为 8 格物尺， d = ? r = ? 气孔密度＝a / (πr2) 6 注意事项 胶棉液涂均匀、超薄一层 叶表皮取下后要迅速投入乙醇（2秒）？ 物镜测微尺安全使用，切勿压破 先低倍后高倍，由远及近，缓慢调节 低倍镜找视野、物尺、目尺 高倍镜观测气孔数目、大小 7 思考题 1 两种方法观察气孔数目所得结果，哪个气孔数目多？为什么？ 2 比较何种溶液中气孔开度最大？为什么？ 大小 开度 视野10格物尺 r = ? 计算气孔密度 22格目尺对 8 格物尺 目尺每格＝ 8×10 / 22