纤维素酶高产菌的筛选鉴定及纤维素酶基因的克隆与表达_刘海艳.pdfVIP

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2017-05-09 发布于浙江
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纤维素酶高产菌的筛选鉴定及纤维素酶基因的克隆与表达_刘海艳

中国农业大学学报，（）：２０１２１７５９２９８　－ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔ　　　ｇ　ｙ纤维素酶高产菌的筛选鉴定及纤维素酶基因的克隆与表达刘海艳白龙赵海波杨明明曹斌云＊　　　　（，）西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌７１２１００，（），摘要为寻找新纤维素酶和纤维素酶基因资源以羧甲基纤维素钠ＣＭＣ改良的ＢＨＭ培养基筛选菌株经初　　，；筛和复筛筛选出目的菌株后采用革兰氏染色法和１６ＳｒＤＮＡ基因片段比对法对筛选出的菌株进行鉴定设计引，（）（），物对扩增其纤维素酶基因连于载体构建原核表达载体并转入大肠杆菌进行表达表ＰＥＴ２８ａ＋ＢＬ２１ＤＥ３ｐ－。，达结果采用ＳＤＳＰＡＧＥ和测定表达产物活性的方法来检验结果显示本研究成功筛选出一株新的具有较高纤维－，，素酶活的短小芽孢杆菌ＢＹ１该菌所产纤维素酶具有较好的热稳定性和酸碱稳定性最适宜温度和Ｈ分别为５５－ｐ，／（ · ）；，和在此条件下最高酶活性为此外还成功克隆出个的纤维素酶新 ℃ ７．４５０．９２１６ｍｏｌｍＬｍｉｎ１１８５１ｂ　 μ 　ｐ，／，，基因具有纤维素酶结构经诱导图谱上于有个明显的蛋白条ｂｌＣＢＹＧＨ９ＣＢＭ３ＩＰＴＧＳＤＳＰＡＧＥ７０ｋｕ１ｇ－－带，／（ · ）。，表达产物酶活性为０．５４１３ｍｏｌｍＬｍｉｎ本研究筛选出的短小芽孢杆菌内切纤维素酶活较高具有一定　 μ 的应用前景。；；；；关键词纤维分解菌筛选纤维素酶基因克隆表达　中图分类号