非标记型溶菌酶荧光传感器的研究.pdf

第42卷第6期 应 用 化 工 V01．42No．6 2013年6月 AppliedChemicalIndustry Jun．2013 驴 驴 痧 痧 ·句 2分析测试8 眵 驴 驴 驴 、驴 ，tp 非标记型溶菌酶荧光传感器的研究 王敏娟 (宝鸡文理学院化学化工学院，陕西宝鸡 721013) 摘 要：以溴化乙锭作为信号物质，以溶菌酶适配体作为分子识别物质，构建了无需标记的在均相溶液中检测溶菌 酶的荧光传感器。在优化的条件下 ，该方法的检出限为3×10～mol／L，线性范围为 1．0×10～-9．0×10～mol／L， 相关系数为0．9938。该方法不需要对适体和 目标物进行标记，且具有选择性好、简单易行的特点。 关键词：核酸适配体；溴化乙锭 ；荧光传感器 中图分类号：0657．3 文献标识码：A 文章编号：1671—3206(2013)06—1151—03 Label-freefluorescencesensorforlysozymedetection WANGMin-juan (DepartmentofChemistryandChemicalEngineering，BaliUniversityofArtsnadSciences，Baoji721013，China) Abstract：A label—freefluorescencesensorwasdevelopedforlysozymedetectionbasedonusnigLBA flS moleculerecognitionprobeandEBasthefluorescenceprobe．Thechangeoffluorescencewasproportion- altotheconcentrationoflysozymeintherangeofl×10一～9X10～mol／L(R：O．9938)withadetec— tionlimitof3X10～mol／L．ThemethoddoesnotneedanylabelingofhteDNA andthetarget，itissire— pieandhighlyselective． Keywords：aptamer；ethidium bromide；fluorescencesensor 溶菌酶是一种球状的蛋白，它由129个氨基酸 1 实验部分 组成，分子量为 14307，等电点是 11·35。溶菌酶在 1 ． 1 材料与仪器 哺乳动物的体内普遍存在，有 “人体 自身的抗生素” 溶菌酶；牛血清蛋白；葡萄糖氧化酶；超纯水 之称-．rll。然而，当溶菌酶在人体类的浓度超过 6× (18Mf1．锄) ；溶菌酶适配体(LBA)(5-CAGTGTATC． 10。mol／L时，人体的免疫系统将会产生紊乱。因 TAcCAA耵℃AT℃AGCGCTAAAGAG CAGA ACTrAG 此，建立一种快速、简单的用于检测溶菌酶的新方法 ．3’)，与溶菌酶适配体部分互补的DNA序列 (pcD． 尤为重要。 NA)5’．C GArACACTG-3’均 由上海生工生物工 适配体 刮能够特异性识别一系列 目标物质的 程技术服务有限公司合成，使用前未进一步纯化；寡 单链寡核苷酸片段，它具有高的亲和性和特异性，还 核苷酸溶液均用20nHnol／，LTfisHC1(pH=7．4)缓 具有稳定性高、可重复利用、易于合成和修饰等特 冲液配制，5℃保存备用；溴化乙锭。 点。