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鱼类组织胚胎学 绪 论 一、组织胚胎学的研究内容 二、组织胚胎学的研究方法 三、组织胚胎学课程的作用与学习要求 一、组织胚胎学的研究内容 组织胚胎学包括： 组织学 胚胎学 （一）组织学（Histology） 概念：组织学是研究生物体（鱼体）微细结构的一门科学。 研究内容：包括细胞、基本组织、器官组织三个部分。 细胞:是机体形态结构的基本单位，是新陈代谢、生长发育和增殖分化的结构基础。 组织:是由许多在结构和功能上密切相关的细胞，借细胞间质结合在一起所构成的细胞群体。组织根据其来源、功能和结构特点，通常将机体所有的组织分为四大类，即上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织，统称为基本组织。 器官:是由几种不同的组织按一定的规律结合而成，如心、肝、脾、肺、肾等。每一器官各有一定的形态结构和特定的生理机能。 系统：由许多功能相关的器官联合在一起构成。每个系统在体内执行特定的相对独立的功能。 （二）胚胎学(Embryology) 概念：研究（鱼体）胚胎发育的科学。胚胎发育是指从受精卵开始到幼体的形成并破膜而出（孵出）或脱离母体（产出）的整个过程。 研究内容：包括胚前发育、胚胎发育、胚后发育三个部分。 机体的各种结构和功能都需要经过一定的发生发展过程逐渐形成和不断完善。在了解机体发生发展规律的基础上，可以更好地理解其结构和功能。 1664年，英国学者Robert Hooke自制的放大镜观察软木薄片，发现了许多小格，把它命名为“cell”，即细胞 荷兰学者Leeuwenhoek用高倍放大镜发现了精子、红细胞、肌细胞和神经细胞等。 组织培养术、细胞融合术、免疫组织化学和免疫细胞化学术、放射自显影术、荧光和激光术、原位杂交术、图像分析和立体计量术等。 17世纪50年代，英国学者Harvey提出“一切生命皆来自卵”的假设。随后，荷兰学者Leeuwenhoek和Graaf分别发现精子与卵泡，提出“先成论”学说 18世纪中叶，德国学者Wolff提出了“渐成论”学说，认为胚胎是经历了由简单到复杂的渐变过程而形成的。1885年，德国学者Remark提出了胚胎发育的三胚层学说。 20世纪的70年代，试管婴儿诞生，90年代克隆动物问世。 组织学与胚胎学是利用显微镜进行观察研究。光学显微镜下所见的结构称光镜结构，其分辨率约为0.2μm，可将物体放大约1500倍。有的光镜虽可放大4000倍，但其分辨率不高。电子显微镜 （EM，简称电镜）下所见的结构称超微结构其分辨率可达 0.2nm，可将物体放大100万倍。 光镜和电镜常用的计量单位和换算关系是： 1mm(毫米，millimeter) = 1000μm 1μm (微米，micrometer) = 1000nm 1nm (纳米，nanometer) = 1000pm 1pm (皮米，picometer) = 1/106μm 二、组织胚胎学的研究方法 研究组织胚胎学的常用方法有： 光镜技术 电镜技术 组织化学技术 光镜技术 .石蜡切片技术(H.E染色) 取材和固定; 脱水和包埋; 切片和染色; 封片。 组织切片染色法－HE染色 苏木精(Hematoxylin)：碱性染料，使C核内的染色质及C质内的核糖体染成蓝紫色。 伊红(Eosin)：酸性染料，使C质和C外基质中的成分染成红色。 染色过程： 鱼的胆管 鱼的肾脏 其他切片与染色技术: 火棉胶切片； 冰冻切片； 涂片、铺片、磨片。 硝酸银染色法: 神经细胞(黑)。 血 液 神经组织 （二）电镜技术 透射电镜：观察组织或细胞内部更细微的结构, 即超微结构。 扫描电镜 观察组织或细胞表面的立体结构。 1、透射电镜: 2、扫描电镜： （三）组织化学技术: 是应用化学、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技术, 与组织学技术相结合而产生的综合技术, 能在组织切片定性、定位、定量地显示某种物质的存在与否以及分布状态。 过碘酸 Schiff反应(periodin acid Schiff reaction)：简称 PAS反应，是确定组织或细胞中有无多糖存在的一种方法。 暗视野显微镜术 暗视野显微镜与普通光镜相比，其主要特点是分辨率较高。其内部装有暗视野集光器，视野内不能直接看到照明光线而呈黑暗状态。由于被检物体表面衍射或散射的光亮，可以观察物体的外形和运动，如细胞核、线粒体和纤毛的运动。 荧光显微镜术 荧光显微镜是用来观察标本中的自发荧光物质或以荧光素染色或标记的细胞和结构。 相差显微镜术 相差显微镜用于观察组织培养中活细胞的形态结构。活细胞无色透明，一般光镜下不易分辨细胞轮廓及其结构。相差显微镜能将活细胞不同厚度及细胞内各种结构对光产生的不同折射