1.这种复制形式.ppt

复制 Replication (P84) 一、 复制子 Replicon 是DNA的一个复制单元。它包括DNA每条链的一个复制起点序列和一些终止序列。 （1）A、B两条链是互补关系，不相同。所以，两条链的起点序列不一样。 （2）A、B两条链的起点位置有时不同。 2.强调“一些终止序列”的原因： （1）DNA有线状和环状、平齐末端、粘性末端多种形式，所以终点序列形式多样性。 （2）“终止序列”用于复制中。“终止子”用于转录中。 4. “复制起点” Origin 即复制原点。 （1）代号：“ori”,“oriC”,“O”。 （2）原核生物“ori”有五点特征： （见P104） （2）原核生物“ori”特征： ? “ori”是一段较长的序列。 如E.coli的“ori”约245bp。 ? 富含A/T序列； 如G-细菌ori中，A/T占56%。 ?有正向重复序列； 如G-细菌ori中，8-14次出现“GATC”。 ?有反向重复序列（即回文序列）； ?复制中，多次发动“ori”启动，以提高复制的速度。 二、复制叉Replication fork 这是复制中的生长点（growing point），也是正在进行复制的DNA的Y状位点。 一般从“ori”开始出现复制眼时，就有两个复制叉产生。这两个复制叉的移动速度和距离不一定相同。 几种复制叉移动形式： 一个复制叉移动完成整个复制过程的。 一般是环状DNA复制形式。 如质粒DNA的复制。 2. “双向复制” 又分为： （1）双向对称复制 如原核生物E.coli的DNA复制。 （2）双向不对称复制。 如枯草杆菌DNA复制。 如枯草杆菌DNA复制。 左边的复制叉开始移动，完成4/5的复制。 两个复制叉的移动特点： 不同步（时差）； 不对称（距离差）。 第二节 原核生物复制中的酶类 一、DNA聚合酶（DNA polymerase） 1.原核生物（E.coli）DNA聚合酶Ⅰ: 该酶的“核酸酶活性”与“在复制中的作用”是两个概念。要分清！ （1）DNA聚合酶Ⅰ的核酸酶活性： ? 5’→3’聚合酶活性 ? 3’→5’外切活性 ? 5’→3’外切活性 ? dNTP→dNMP+PPi（焦磷酸解活性） （2）DNA聚合酶Ⅰ在复制中的主要作用： ?识别、切除错误核苷酸。 ?切除引物RNA。 ?填补空缺的DNA。 总之，它是矫正、修复酶。 ? ? ? 2.DNA聚合酶II 至今了解甚少。 （新书中报道：DNA聚合酶Ⅱ在修复中起作用。） 3.DNA聚合酶III （2）酶III在复制中的作用： 是DNA复制延长中主要合成的酶。 更确切说：DNA天然聚合酶III （polIII*）起延长主要作用。 二、螺旋酶或解旋酶 Helicases 1.：给DNA某种螺旋作用，增大DNA单链泡状结构，促进DNA两条链分开为单链。 2.注意：过去叫它“解链酶”，但现在不用了。 3.螺旋酶作用方式： （1）螺旋酶III、rep蛋白。 沿着模板DNA3’→5’方向移动，分开DNA双链。需要SSB的帮忙稳定解开的单链。 三、拓扑异构酶I、II（其中II酶即“DNA旋转酶gyrase ”） 1.主要功能： （1）引入超螺旋，增大DNA单链泡状结构，便于酶、因子识别或结合DNA，有利于复制、转录、调控的起始。 （2）引入超螺旋，缓解复制叉前进而造成的超缠现象。 （3）引入超螺旋，使DNA在复制、转录中恢复双螺旋结构。 3.两种拓扑酶的区别： 四、引发酶Primase 1.酶作用：合成引物RNA，为DNA的合成起头。 2..本书认为：此酶是合成引物的酶，不要叫它“引物酶”。因为，引物酶是水解引物的酶。 3.引物（Primer）：是一段RNA，可长达50-60nt，它能与DNA结合，也能让DNA聚合酶紧接其后延长DNA。 4.引发酶与RNA聚合酶不一样： 第三节 DNA复制的形式 一、滚环式复制 Rolling circle replication 一、滚环式复制 1.名称：也叫“σ复制”或 “共价延伸” 。 2.这种复制方式在下列生物DNA中有： （1）噬菌体：M13、φ?174、G4、λDNA后期基因复制。 （2）细菌：E.coli DNA、细菌致育因子F。 （3）真核生物：非洲爪蟾卵母细胞rDNA的复制。 3.滚环复制过程： （1）双链环状DNA的（+）链从“ori”处切刻开。5’-端离开环。 3.滚环复制过程： DNA聚合酶以（-）链环为模板，从（+）链的3’-OH端共价延伸，合成子代（+）链DNA。 3.滚环复制过程： (4)DNA聚合酶以延伸的单链DNA为模板，合成子代双链DNA。 3.滚环复制过程