类风湿关节炎患者血清和关节液中趋化因子的测定及其意义.docVIP

　　类风湿关节炎患者血清和关节液中趋化因子的测定及其意义 【关键词】 类风湿关节炎　关节液中趋化因子的测定 　　据最新统计，类风湿关节炎( rheumatoid arthritis, RA)在全球的发病率为22～60/10万人口，在关节炎中它是致残率较高的疾病。虽然类风湿关节炎的发病机制 目前 仍不十分明确，但是许多 研究 表明细胞因子作用于多种细胞并且相互调节形成一个 网络 ，在类风湿关节炎的滑膜病变中起着核心作用［１］。调节活化正常T细胞表达和分泌因子(regulated on activation normal T cell expressed and secreted，RANTES)及SDF-1 (stromal cell-derived factor-1)均为炎症性趋化因子，具有调节T淋巴细胞分化的功能。作者对RA患者血清和病变膝关节滑液中RANTES和SDF-1水平进行检测，并与外伤截肢者对照，旨在探讨其在RA发病中的作用。 　　1 资料与 方法 　　1.1 一般资料 　　实验组血清及膝关节滑液取材于2002至2005年金华各 医院 风湿科初诊RA患者23例，均符合1987年美国风湿病协会修订的类风湿关节炎诊断标准。对照组血清及膝关节滑液均为本院因外伤截肢患者共16例。 　　1.2 标本收集 　　抽取空腹外周静脉血5ml，以2500r/min离心15min，取血清，置于－20℃备检。细针抽取关节滑液2ml，置于－80℃备检。 　　1.3 检测方法 　　RANTES及SDF-1的检测采用酶联免疫吸附试验（ELISA），操作按照RD试剂盒说明书进行。其主要步骤为：分别向包被鼠抗人RANTES单抗和SDF-1单抗的微孔内加入50μl的RANTES、SDF-1标准品或检测血清、按1：3稀释的关节滑液，将96孔板盖上薄膜置于室温中孵育2 h，孵育后洗涤3次。分别加入50μl酶联复合物，显色，全自动酶标仪分别读取RANTES及SDF-1浓度，标本均行复孔检测，均值为终浓度。 　　1.4 统计学处理 　　数据以(x±s)表示，两组间比较采用SPSS 11.0软件，作t检验。 　　2 结果 两组血清及滑液RANTES、SDF-1水平的比较见表1，RA组患者血清及关节滑液RNATES的水平显著高于对照组，且RA组内关节滑液中的含量较血清中明显升高，差异有显著性（Plt;0.05）。RA患者血清及关节滑液SDF-1的水平高于对照组，差异有显著性（Plt;0.01），但是RA组内关节滑液中的SDF-1含量与血清相比，差异无显著性。表1 两组血清及滑液RANTES、SDF-1的水平（略）注：同组内与血清水平比较Plt;0.01；与对照组比较＃Plt;0.05 　　3 讨论 RA是以关节滑膜有慢性炎症和血管翳形成，软骨和软骨下骨破坏，最终造成关节软骨破坏并导致关节畸形和强直，为主要病理改变的自身免疫性疾病。而趋化因子是一组具有趋化作用的细胞因子,能吸引免疫细胞到免疫应答局部,参与免疫调节和免疫病理反应。有 研究 证实，RANTES 通过与细胞表面相应的CC 亚族趋化因子受体(CCR1、CCR3 和CCR5) 结合，特异吸引CD4+ / CDRO45+ T 细胞进入炎性部位，在RA的发生 发展 中起着极为重要的作用。RANTES介导炎症过程与其受体CCR5内皮细胞上的表达密切相关［2］。基质细胞衍生因子一1(SDF一1)是趋化因子CXC亚家族的重要成员之一，主要表达在慢性炎症组织如银屑病皮肤和风湿病滑膜，通过与其受体CXCR4的结合趋化内皮细胞而参与血管形成过程。在RA 患者的滑膜中，SDF-1可结合在内皮细胞表面的硫酸乙酰肝素分子上，促进血管形成和炎症细胞浸润，从而在RA中发挥多种功能［3］。如调节白细胞通过内皮细胞屏障进入炎症部位，造成组织损伤和疾病状态，与类风湿性关节炎的慢性多关节滑膜炎病变有关［4］。 作者通过采用ELISA 方法 检测RA患者血清及关节液的RANTES、SDF-1水平，并与外伤截肢者对照，结果发现RA患者血清和滑液中RANTES、SDF-1 水平均显著高于对照组（Plt;0.01），且RA 患者关节液RANTES 水平升高更为明显(Plt;0.01)。而RA患者血清SDF-1水平与滑液相比差异无显著性(Pgt;0.05)。本实验中RA患者关节液RANTES 水平升高与血清相比更为明显，提示RA患者血清增高的RANTES主要来自于病变关节部位，这与以前的研究有相似之处。正常情况下,细胞因子的表达和分泌受机体严格的调控,在病理状态下,细胞因子会出现异常性表达,表现为细胞因子及其受体的缺陷,细胞因子表达过高,以及可溶性细胞因子受体的水平增加等。在本实验中发现类风湿关节炎患者的RANTES，SDF-1含量明显增高