食品质量与安全12-医学免疫学-2精要.ppt

（二）种类 按原料来源 1、植物及其提取物： （1）药食两用的中草药：人参、党参、天麻等。 （2）提取的植物化学物：黄酮等 （3）活性植物多糖和膳食纤维 （4）其他：大豆凝脂等 2、动物、动物脏器及其提取物： （1）动物、动物脏器：龟、中华鳖、蛇、珍珠等。 （2）提取物：阿胶、鲨鱼肝油等。 3、菌藻及其提取物： （1）食用菌及其提取物：冬虫夏草、灵芝、茯苓等 （2）螺旋藻等提取物。 （3）活性益生菌类：乳酸菌、双歧杆菌等。 按有效成分： 1、营养补充剂： 矿物质、维生素等。 2、多糖、脂质及蛋白质（肽）： 3、植物化学物质及其它活性物质： （三）对原辅材料的管理 保健食品中禁止加入药物！ （四）生产与监控 （五）检测及评价 1、评价内容：功能学评价为最主要。 2、安全性评价： 3、功效成分或标志性成分检测： 三、功能评价 （一）功能评价依据 “保健食品检验与评价技术规范”为依据。 （二）功能学检验机构 需国家食品药品监督管理局（SFDA）认定和批准。 （三）功能评价内容 1、人体试食：自愿者，三甲医院配合。 2、动物试验：最普遍。 3、免疫调节作用评价 （1）人体试食：淋巴细胞转化；单向免疫扩散法测定IgG、IgM和IgA等；NK细胞杀伤活性检测；吞噬细胞的吞噬和杀菌效应。 （2）动物试验 ①免疫器官质量的测定：胸腺、脾脏等 ②细胞免疫功能评价： T细胞转化、迟发型超敏反应（DTH）、NK细胞活性等。 ③体液免疫功能评价： 抗体生成细胞检测、血清溶血素测定。 ④非特异免疫功能评价： 小鼠碳粒廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验。 流式细胞仪工作原理 4、荧光偏振免疫测定（fluorescence polarization immunoassay，FPIA） 均相竞争法，荧光素标记的半抗原与标本中的待测半抗原与一定量抗体竞争结合；偏振荧光强度与标本中待测半抗原浓度成反比；可用于小分子半抗原特别是药物的测定。 5、时间分辨荧光免疫测定（time resolved fluorescence immunoassay，TR-FIA） 以稀土螯合物如铕（Eu）作为荧光标记物；Eu具长寿命荧光，比背景荧光长百万倍，待短寿命的本底荧光完全衰退后再进行测定，所得信号完全为长寿命螯合物的荧光；其测定方法相似于ELISA，将Eu标记抗体等；所测仪器为时间分辨荧光计。 四、发光免疫分析技术 将发光分析与免疫反应结合的一种超微量分析技术。将鲁米诺等发光剂标记抗体（抗原），通过发光检测抗原（抗体）。 该发光为化学发光（化学反应过程释放的能量激发了发光剂发光）。 敏感性高、不需外来光源、信噪比高、仪器简单、分析简便快速。 一般用化学发光分析仪检测。 常用化学发光剂：鲁米诺（luminol）、吖啶酯等。 1、化学发光免疫测定（chemiluminescent immunoassay，CLIA） 发光剂标记抗体或抗原。 2、电化学发光免疫测定（electro chemiluminescent immunoassay，ECLIA） 五、免疫胶体金标记技术 免疫胶体金标记技术（immunogic colloidal gold signature，ICS）。 胶体金（colloidal gold）：金盐被还原成原金 后形成的金颗粒悬液。四氯金酸（HAuCl4）在 柠檬酸钠等还原剂作用下聚合形成；一般大小 1-100nm，直径5-20nm呈葡萄酒色，20-40nm 呈深红色。在碱性环境下带负电荷，与抗体等 带正电荷的蛋白分子牢固结合而标记蛋白。 高电子密度等特性。 免疫金（immunogold）：胶体金与抗体（抗原） 的结合物。 常见方法 1、免疫胶体金组织化学技术 因高电子密度特性可借助显微镜观察，定性、定 位测定组织或细胞中抗原。 2、免疫胶体金测定技术 （1）液相法：凝集试验等 （2）固相法 i、斑点免疫金银染色法（dot-IGS/IGSS） dot-ELISA与免疫胶体金结合。 NC膜+待测蛋白抗原+特异性一抗+胶体金标记的 二抗（金颗粒聚集，形成肉眼可见的红色斑点即 dot-IGS，此时进行银显影液增强处理， 为dot-IGSS）。 ii、斑点免疫金渗滤测定法： 原理完全同于斑点免疫金银染色法，仅在NC膜下垫以吸水性强的垫料（