Purification and characterization of hydroquinone dioxygenase from Sphingomonas sp. strain TTNP3 英文参考文献.docVIP

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2017-05-12 发布于上海
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Purification and characterization of hydroquinone dioxygenase from Sphingomonas sp. strain TTNP3 英文参考文献.doc

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Purification and characterization of hydroquinone dioxygenase from Sphingomonas sp. strain TTNP3 英文参考文献

Kolvenbachetal.AMBExpress2011,1:8 /content/1/1/8 ORIGINAL OpenAccess Purificationandcharacterizationofhydroquinone dioxygenasefromSphingomonassp.strainTTNP3 BorisAKolvenbach1,2*,MarkusLenz1,DirkBenndorf3,ErdmannRapp4,JanFousek5,6,CestmirVlcek5,6, AndreasSch?ffer2,FrédéricLPGabriel7,Hans-PeterEKohler8andPhilippeFXCorvini1,9 Abstract Hydroquinone-1,2-dioxygenase,anenzymeinvolvedinthedegradationofalkylphenolsinSphingomonassp.strain TTNP3waspurifiedtoapparenthomogeneity.Theextradioldioxygenasecatalyzedtheringfissionof hydroquinoneto4-hydroxymuconicsemialdehydeandthedegradationofchlorinatedandseveralalkylated hydroquinones.Theactivityof1mgofthepurifiedenzymewithunsubstitutedhydroquinonewas6.1μmolper minute,theapparentKm 2.2μM.ICP-MSanalysisrevealedanironcontentof1.4molespermoleenzyme.The enzymelostactivityuponexposuretooxygen,butcouldbereactivatedbyFe(II)inpresenceofascorbate.SDS- PAGEanalysisofthepurifiedenzymeyieldedtwobandsofanapparentsizeof38kDaand19kDa,respectively. DatafromMALDI-TOFanalysesofpeptidesoftherespectivebandsmatchedwiththededucedaminoacid sequencesoftwoneighboringopenreadingframesfoundingenomicDNAofSphingomonasspstrainTTNP3.The deducedaminoacidsequencesshowed62%and47%identitytothelargeandsmallsubunitofhydroquinone dioxygenasefromPseudomonasfluorescensstrainACB,respectively.Thisheterotetramericenzymeisthefirstofits kindfoundinastrainofthegenusSphingomonassensulatu. Keywords:hydroquinonedioxygenase,Sphingomonas,nonylphenol,bisphenolA Introduction containing Fe(II) intheir active center, resulting inthe BothSphingomonassp.strainTTNP3andSphingobium formation of 4-hydroxymuconic acid semialdehyde xenophagumBayramareabletodegradeseveralbranched (HMSA) (Chauhan et al. 2000; Miyauchi et al. 1999; isomers of nonylphenol and bisphenol A, well-known Moonenetal.2008b).Thesecondpathwayrequiresthe endocrinedisruptors,byipsosubstitution.i.e.ipso-hydro- hydroxylation of hydroquinone to benzene-1,2,4-triol xylationandsubsequentdetachmentofthesidechainof