麻疯树提取物体外抗病毒和杀菌作用的初步研究的论文.docVIP

　　麻疯树提取物体外抗病毒和杀菌作用的初步研究的论文 作者：刘娟，雷蕾，唐琳，李昱星，陈放 【摘要】 　　目的研究麻疯树提取物的体外抗病毒和杀菌作用，为进一步提取分离有效成分提供实验依据。方法采用细胞培养技术，观察麻疯树1，2，3号提取物对单纯疱疹ⅰ型病毒（hsv-ⅰ）、单纯疱疹ⅱ型病毒（hsv-ⅱ）和流感a3型病毒（a3）的直接灭活作用以及抑制它们增殖的作用；采用悬液定量杀菌法，观察麻疯树1号提取物对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭作用。结果麻疯树1，2，3号提取物对细胞的毒性较小；提取物既能抑制单纯疱疹病毒在胞内的增殖，又能直接灭活该病毒；总体而言，提取物对hsv-ⅰ在胞内增殖的抑制作用略优于hsv-ⅱ，对hsv-ⅰ的直接灭活作用更是显著强于hsv-ⅱ；提取物对a3的直接灭活作用效果显著；3号提取物还能抑制a3在鸡胚内的增殖。麻疯树1号提取物对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有极强的杀灭作用。结论麻疯树提取物具有体外抗病毒、杀菌的作用。 【关键词】 麻疯树 提取物 抗病毒 杀菌 　　abstract：objectiveto provide an experimental evidence for further extraction and separation of active ponents, jatropha curcas l. in vitro. methodsethod of cell culture to observe extracts from jatropha curcas l., no.1,2,3, directly killing herpes simplex virus (hsv-ⅰⅱ) and influenza virus a3, as ent, jatropha curcas l. on candida albicans, staphylococcus aureaus and escherichia coli. resultsthe extracts from jatropha curcas l., no.1,2,3, had loplex virus from proliferating in cells and directly kill the virus. their inhibitory action on the proliferation of hsv-ⅰbryonated egg. furthermore, no.1 extract had a very strong bactericidal effect on candida albicans, staphylococcus aureaus and escherichia coli.conclusionextracts from jatropha curcas l. have antivirus and bactericidal effects in vitro. 　　key g/ml，武汉五景药业有限公司生产，批号病毒唑注射液，100 mg/ml，宜昌三峡制药厂生产，批号 　　1.6 仪器与试剂96孔细胞培养板；co2孵箱（日本yamato 科学株式会社）；倒置显微镜（重庆光学仪器厂，型号：1833670）；微孔滤器。dmem干粉培养基（美国invitrogen公司，批号：1290007）、胎牛血清、吐温。细胞生长液（含10％胎牛血清）、维持液、消化液以及胰酶液（含2％胎牛血清）等按《医学病毒学基础及实验技术》［8］配制。胰蛋白胨大豆琼脂培养基（tsa）、胰蛋白胨大豆肉汤培养基（tsb）、磷酸盐缓冲液（pbs）等按《消毒技术规范》［9］配制。 　 　2 方法与结果 　　2.1 药物体外抗单纯疱疹病毒（hsv）实验［8］ 　　2.1.1 hsv对vero细胞的毒力测定将长成单层的vero细胞用胰酶液消化成单个细胞，以细胞生长液调整细胞数至8.0×104ml。按每孔0.1 ml加入96孔细胞培养板内，放在37℃，5%co2孵箱中培养24 h。待96孔细胞培养板内的vero细胞长成单层后，取上述制备好的hsv-ⅰ和hsv-ⅱ毒株，用维持液将其分别做10倍系列稀释(10-1～10-10)，然后按0.1 ml/孔接种于细胞培养板内的vero单层细胞中，每浓度6个复孔，同时设细胞对照。置37℃，5%co2孵箱中培养7 d，每日观察并记录细胞病变（cytopathic effect，cpe），测定组织细胞半数感染量(tcid50)。结果见表1。表1 单纯疱疹病毒的毒力测定（略） 按照reed-muench氏法［8］ 计算 ，hsv-ⅰ和h