麻黄连轺赤小豆汤拆方抗过敏反应作用研究.docVIP

　　麻黄连轺赤小豆汤拆方抗过敏反应作用研究 作者：陈建　刘敏　王梅　赵国臣 【摘要】 　　目的：探讨麻黄连轺赤小豆汤方的配伍 规律 及其抗过敏反应的机制。 方法 ：将麻黄连轺赤小豆汤方拆为解表散邪组、清热利湿组及调和营卫组。进行拆方实验，观察其对右旋糖酐致小鼠全身瘙痒实验、小鼠耳异种被动皮肤过敏反应实验及致敏大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒的 影响 。结果与结论:清热利湿组在3个实验中都不同程度地优于解表散邪组、调和营卫组。说明清热利湿药物在方中起着主要的作用，提示Ⅰ型变态反应性疾病的发生与 发展 可能与湿热毒邪蕴结密切相关。 【关键词】 麻黄连轺赤小豆汤／药效学；麻黄连轺赤小豆汤／ 治疗 应用 ；Ⅰ型变态反应 　　麻黄连轺赤小豆汤是《伤寒论》中的经典方剂，原本治疗阳黄兼表之证，具有清热利湿、解表散邪之功。后世医家根据其功效，广泛用于荨麻疹、湿疹、过敏性哮喘等过敏性疾病的治疗，取得了一定的疗效。已有实验证实该方确有抗过敏反应的作用［1］,为进一步明确该方的配伍规律，探索Ⅰ型变态反应性疾病的病机特点，为临床治疗Ⅰ型变态反应性疾病在选择治法上提供了一定的客观依据。 1 材料与试药 1.1 药物与试剂 对麻黄连轺赤小豆汤拆方得：解表散邪组(麻黄6g，杏仁10g，甘草6g)、清热利湿组(赤小豆30g，桑白皮18g，连翘6g)、调和营卫组(生姜6g，大枣10g)。药物剂量严格按《伤寒论》原方剂量与比例 计算 而来。原方中之连轺、生梓白皮现多不用，常以连翘、桑白皮代，本实验亦是如此。生药购于南京中医药大学国医堂药房，以10倍量水煎煮2次，合并滤液，浓缩成所需浓度，4℃保存。马来酸氯苯那敏片(湖北华中药业有限公司，批号、右旋糖酐(上海华源长富药业有限公司，批号：040901103)、盐酸噻庚啶(上海复旦复华药业有限公司，产品批号：041007)、卵白蛋白(美国Sigma公司，A5253，华美生物工程公司分装)、吸附百白破联合疫苗( 中国 生物技术集团公司上海生物制品 研究 所，批号：2004110104)等。 1.2 动物 昆明种小白鼠168只，普通级，雄性，体重18-22g；SD大鼠83只，普通级，全雄，体重180-220g，小鼠、大鼠均由南京中医药大学动物实验中心提供。以上动物均随机分组。 1.3 仪器 电动离心机(LDZ52，北京医用离心机厂)，752可见光/紫外光分光光度计(上海第二 分析 仪器厂)；OLYMPUS光学显微镜(日本，编号：290765)等。 2 方法与结果 2.1 麻黄连轺赤小豆汤及拆方组对右旋糖酐致小鼠全身瘙痒的影响［2］ 将84只小鼠随机分为7组，每组12只，分别为全方组、解表散邪组、清热利湿组、调和营卫组、西药对照组、模型组、空白组。于实验前7d起，中药全方组及各拆方组分别灌服配制好的相对应的中药20ml/kg，扑尔敏对照组灌药量为4mg/kg，模型组、空白组均灌服生理盐水20ml/kg，每天1次，连续7d。于第7d各组分别灌胃给药或生理盐水30min后，向小鼠尾静脉注射右旋糖酐(1.25mg/kg)。以小鼠前爪搔抓头部，后爪搔躯干，嘴咬全身各部位作为瘙痒指征，记录30min内小鼠搔痒次数，以此评价各组药物抗组胺止痒的作用。结果见表1。表1 麻黄连轺赤小豆汤及拆方组对右旋糖酐致小鼠瘙痒的影响结果，麻黄连轺赤小豆汤全方组与各拆方组相比较均有不同程度的差异，与扑尔敏组相比较无明显差异，P＞0.05。清热利湿组抗组胺作用优于解表散邪组，P＜0.05；明显优于调和营卫组，P＜0.01。解表散邪组抗组胺作用明显优于调和营卫组，P＜0.01。 2.2 麻黄连轺赤小豆汤及拆方组对IgE抗体产生的影响［2-3］ 抗血清制备：取上述大鼠21只，随机分为7组，分组如实验1。空白组大鼠分别于大腿两侧肌肉注射0.5ml的生理盐水，同时腹腔注射1ml的生理盐水，其余各组，均以1%的卵白蛋白生理盐水0.5ml分别肌注于大鼠的后腿两侧，同时腹腔注射免疫佐剂百白破疫苗1ml(每毫升含百日咳灭活杆菌90亿个)。于注射的第3d开始，除了空白组及模型组大鼠给以生理盐水1ml/100g以外，其余各中药组均灌以相对应的中药1ml/100g，西药对照组灌服盐酸噻庚啶0.625mg/kg。注射卵白蛋白后第12d，杀鼠，摘眼球取血，以3000转/min分离血清，15min，将各组血清混合，-40℃保存备用。 取上述小鼠84只，随机分为7组，分组如上。各组小鼠于两耳廓皮下分别注射相对应的原倍大鼠抗血清20μl/只，48h后尾静脉注射0.25ml含0.5%伊文思蓝及2mg/ml卵白蛋白溶液，0.5h后处死，剪下两耳蓝染部分皮肤，置丙酮-生理盐水(7：3)溶液5ml中静置48h，以3000转/min离心10min，取上清于