黄芩群体不同形态变异类型遗传多样性的AFLP分析.docVIP

　　黄芩群体不同形态变异类型遗传多样性的AFLP分析 作者：杨全，罗烈伟，罗贵超，王文全，张卉 【摘要】 目的 研究 黄芩群体形态变异类型的遗传多样性。 方法 采用扩增片段长度多态性(AFLP)技术，对人工栽培群体的8个形态变异类型黄芩进行多态性 分析 。结果 通过筛选得到9对AFLP引物组合，共扩增出2 834个DNA条带，多态性条带为1 332个，多态性位点平均为47.8%。聚类分析结果表明，8个形态变异类型黄芩划分为4类。其中，绿茎、小叶、少分枝和紫色花类型与普通类型各自聚为一类，绿茎、大叶、少分枝和淡紫色花类型与紫红茎、大叶、少分枝和紫色花类型聚为一类，绿茎、小叶、多分枝和淡紫色花类型，绿茎、大叶、多分枝和紫色花类型，绿茎、小叶、多分枝和淡紫色花类型与紫红茎、小叶、多分枝和紫色花类型聚为一类。结论 人工栽培群体黄芩形态变异类型间存在较高多态性，遗传多样性较丰富。 【关键词】 黄芩；形态变异；扩增片段长度多态性；遗传多样性 　　Abstract:Objective To investigate the geic diversity of morphological variation types in Scutellaria baicalensis Georgi.Method Using the AFLP technology, the polymorphisms of 8 cultivated variation types in S. baicalensis Georgi ers screened, 2 834 DNA bands plified, among orphic. The polymorphic locus orphological variation types of S. baicalensis Georgi , small leaf, feon type , big leaf, feauve flo, big leaf, fe, small leaf, multibranch, mauve flo, big leaf, multibranch, purple flo, small leaf, multibranch, mauve flo, small leaf, multibranch, purple floorphism among morphological variation types and rich geic diversity. 　　Key orphological variation; amplified fragment length polymorphism; geic diversity 　　黄芩Scutellaria baicalensis Georgi具清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效［1］，为常用中药材之一，是国家三级保护野生药材物种。近年来对黄芩药材的需求量剧增，导致野生资源被过度采挖，资源大幅减少。 目前 ，人工栽培黄芩药材已经成为临床以及中成药原料的主要来源，但是，人工栽培黄芩由于种子混杂、退化等多种因素，不但药材的质量、产量差异较大［2-4］，而且群体中不同单株在茎颜色、株高、地茎、分枝数和叶片大小等农艺指标上存在显著差异［5］，严重 影响 了黄芩的大面积生产。本文采用扩增片段长度多态性（amplified fragment length polymorphism,AFLP）技术，研究人工栽培群体不同形态变异类型黄芩在分子水平上的遗传变异，旨在揭示黄芩群体内的遗传多样性以及形态变异类型间的亲缘关系，为今后开展资源保存、种质鉴定奠定基础，同时有助于开展分子标记辅助选择育种研究。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　 　　黄芩为栽培于北京市通州区农业技术推广站农业 科技 成果示范基地的2年生人工栽培群体内的形态变异类型，变异类型的名称以及划分指标见表1，每个变异类型选择5个单株，每株取1～2个成熟叶片，混合在一起，置装有变色硅胶的封口袋内，迅速干燥，备用。 　　表1 黄芩形态变异类型命名一览表（略） 　　Tab.1 A list of morphological variation types of Scutellaria baicalensis Georgi 　　注：普通类型为《 中国 植物志》所描述的植物形态类型 　　1.2 总DNA提取 　　 　　采用CTAB［6］法进行黄芩总DNA提取。用U Itrospc 2000 紫外/可见分光光度计检测DNA的纯度及浓度。 　　1.3 AFLP分析 　　 　　接头、引物序列以及实验方案按照鼎国生物技术公司AFLP试剂盒的技术说明书进行。总DNA用PstⅠ和MseⅠ进