黄连消渴颗粒提取工艺改进的研究.docVIP

　　黄连消渴颗粒提取工艺改进的研究 作者：邓月婷 马超英 陈陆 蒋合众 李燕 【摘要】 　　目的改进黄连消渴颗粒的提取工艺。方法分别以盐酸小檗碱和多糖的含量为指标，采用正交设计法和单因素比较法，设计优选了黄连消渴颗粒剂的提取工艺。结果优选出的提取工艺为：黄连与原方中其余四味药分开提取；黄连粗粉浸泡30 min后，用12，10倍量水提取2次，提取时间均为1.5 h；其余4味药一起提取，浸泡30 min，加10倍量水提取1次，提取时间为1.5 h。 结论该实验确定的提取工艺方法合理，稳定可行。 【关键词】 盐酸小檗碱 多糖 提取工艺 　　Abstract：ObjectiveTo improve the extraction technology of Huang-lian-xiao-ke Granule. MethodsThe extraction technology for Huang-lian-xiao-ke Granule ized through single parative and orthogonal laent index. ResultsThe optimized extraction technology for Huang-lian-xiao-ke Granule aterials in the origin prescription in, the coarse poes e and both for 1.5h; after soaked for 30min, the four kinds of raaterials e es embranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao为蒙古黄芪，山药Dioscorea opposita Thunb.为怀山药，其他药材均为主产地优质药材，经西南 交通 大学中药研究所鉴定均为正品。无水葡萄糖对照品由 中国 药品生物制品检验所提供，批号：110833-200302；盐酸小檗碱对照品由中国药品生物制品检验所提供，批号：110713-200208；乙腈、乙醇、磷酸二氢钾均为色谱纯，浓硫酸、苯酚为分析纯；岛津UV300紫外分光光度计；岛津LC-20AT高效液相色谱仪。 　 　2 方法与结果 　　2.1 黄连提取工艺的考察 　　2.1.1 正交实验设计 根据预试结果，以提取时间、料液比、提取次数为3因素，每个因素3个水平，进行L9（34）正交实验。因素水平设计表见表1。 　　 　　2.1.2 正交实验方法与结果称取9份黄连粗粉，每份12 g，按照表1所列因素和水平，加水浸泡30 min后回流提取，趁热抽滤，将提取液定容至500 ml。精密量取以上提取液2 ml，用无水乙醇定容至10 ml。离心，取上清液1 ml，再用无水乙醇定容至10 ml，用0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。按照“2.1.3”项下方法测定盐酸小檗碱的含量。结果见表2。 　　表1 因素水平表（略） 　　表2 正交实验结果（略） 　　由正交实验结果可知，影响提取效果的因素顺序为：C（提取次数）＞A（提取时间）＞B（料液比）。极差结果为A3＞A2＞A1，B3＞B2＞B1，C3＞C2＞C1，直观分析确定最佳提取工艺为：A3B3C3。鉴于提取次数（C）的拐点在C2，考虑实际生产成本，可将提取时间（C）由3次调整为2次。综合考虑，将工艺优化为A3B3C2，即：黄连粗粉浸泡30 min后，用12，10倍量水提取2次，提取时间分别为1.5 h。 　　2.1.3 盐酸小檗碱的含量测定色谱条件：色谱柱为 RP18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液（30∶70）；流速0.8 ml/min；检测波长345 nm；柱温25℃；进样量10 μl。 　　对照品溶液的制备及标准曲线的绘制：精密称取盐酸小檗碱对照品5.0 mg，置10 ml容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取1 ml，置10 ml容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，配成50 μg/ml的对照品溶液，0.45 μm微孔滤膜过滤。分别精密吸取对照品溶液2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 μl，按上述色谱条件测定，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=4 936 700.000 0X－40 780.000 0，r=0.999 9，进样量在0.10～0.50 μg范围内与峰面积呈良好线性关系。 　　样品的测定：分别取上述9份供试液10.0 μl进样，以与对照品相同的方法测定其峰面积，根据回归方程 计算 小檗碱的含量，并由此推算出各因素水平下提取液中盐酸小檗碱含量。 　　2.2