第5章营养类.ppt

无机盐的生理功能： 微生物研究：培养基的配制 细菌在半固体培养基中的生长现象 有鞭毛的细菌，沿穿剌线呈模糊羽毛状生长。 无鞭毛的细菌，沿穿剌线呈清晰的线状生长。 一些鉴别培养基 实验室中常用的微生物培养基 C:Organic-合成培养基: glucose, sucrose, acetate, pyruvate, fatty acids, alkanes 烷烃et al. 天然培养基 : yeast extract, beef extract, peptone, many other complex digests. Inorganic-CO2, HCO3- N: Organic-Amino acids, nitrogenous bases; Inorganic-NH4Cl, (NH4)2SO4, KNO3, N2. P: KH2PO4, Na2HPO4. S: NaSO4, H2S. K: KCl, K2HPO4 Mg: MgCl2, MgSO4 平板划线法获得纯菌落 EMB(Eosin Methylene Blue) Figure 14. Left: Escherichia coli cells. Right: E. coli colonies on EMB Agar. 1.5% Agar （3）氧化还原电势(redox poyential) 是量度某氧化还原系统中还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标 一般以Eh来表示,它是指以氢电极为标准时某氧化还原系统的电极电位值,单位是V或mV 实验中为了获得厌氧条件,常采用在培养基中加入适量的还原剂来获得 培养基中常用的还原剂：巯基乙酸、抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等。 微生物与氧化还原电势 好氧性微生物：+0.1伏以上时可正常生长,以+0.3～+0.4伏为宜； 厌氧性微生物：低于+0.1伏条件下生长； 兼性厌氧微生物：+0.1伏以上时进行好氧呼吸, +0.1伏以下时进行发酵。 4. 经济节约 以粗代精 以野代家 以废代好 以国代进 以简代繁 以氮代朊 以烃代粮 以纤代糖 1.生态模拟 调查所培养菌的生态条件，查看“嗜好”，对“症”下料———初级天然培养基. 2.查阅文献 查阅、分析文献，调查前人的工作资料，借鉴人家的经验，以便从中得到启发设计有自己特色的培养基配方. 3.精心设计 借助优选法或正交试验设计法等方法. 二、设计培养基的方法 ◆称量 (高温灭菌时易分解或变色的成分需另行配制) ◆溶解:自来水或蒸溜水 (防止无机物之间的沉淀) ◆pH调节:盐酸或氢氧化钠(1N以下) ◆灭菌(高压灭菌) 配制方法因培养基种类不同而变化 高压蒸气灭菌 一般培养基: 1.05 Kg/cm2, 121.3℃, 15-30 min 含糖培养基: 0.56 Kg/cm2, 112.6 ℃, 15-30 min 过滤灭菌, 分别灭菌, 间歇灭菌的应用 培养基的灭菌 任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理； 附图：过滤灭菌 器皿的灭菌及无菌室的消毒 器皿的灭菌： 干热空气： 160℃， 2 小时 无菌室的消毒： 紫外光 化学药物熏蒸（苯酚；高锰酸钾+甲醛） 三、培养基的类型及其应用 细菌培养基 放线菌培养基 霉菌培养基 　　酵母菌培养基 　　　　 ★-1 根据所培养微生物的微生物类群来分 ★-1 细菌培养基——营养肉汤（nutrient broth)： 牛肉膏 3g； 水 1000ml； 蛋白胨 5g ； pH 7.2~7.4 放线菌培养基——高氏1号： 可溶性淀粉 20g； KNO3 1g; K2HPO4 1g MgSO4 0.5g NaCl 1g; FeSO4?7H2O 0.5g 水 1000ml; pH 7.2~7.4 霉菌培养基——查氏（zapek)培养基：