第6章蛋白质的结构与功.ppt

(二) 辅基血红素 (四) O2的结合改变肌红蛋白的构象 (五) 肌红蛋白结合氧的定量分析(氧结合曲线) (三) 血红蛋白的协同性氧结合(Hb氧结合曲线) 四、免疫系统和免疫球蛋白 (一)免疫系统 1.免疫学的含义 免疫是指机体识别并清除从外环境中入侵的病原体及其毒素,和内环境中因基因突变产生的异常细胞,保持内环境稳定的功能。 免疫学是研究免疫系统结构,免疫的机制,及利用免疫的方法预防和治疗疾病的学科。 2.非特异性免疫 (2) 体液免疫 由骨髓的多能造血干细胞发育而成的B细胞种类极多，每种B细胞含有一种多个特定的受体(BCR,实际是膜结合的抗体)。 抗原与BCR结合后，通过细胞内信号转导系统启动细胞的快速分裂，使细胞大量增殖。 增殖后的细胞大部分用来产生可溶性抗体，称作浆细胞，一小部分用来产生膜结合抗体，并长期生存，称记忆细胞。 同种抗原再次入侵时，记忆细胞可快速启动免疫系统，疫苗就是根据这一原理设计的。 抗体可结合抗原，并使其失活，称中和作用。 抗原-抗体复合物可以与吞噬细胞的Fc受体结合，促进吞噬作用，称调理作用。 抗原-抗体复合物可以与补体结合，补体使病原体穿孔崩裂，还可促进抗原-抗体复合物与吞噬细胞结合。 (3) 细胞免疫 4.免疫组织和器官 骨髓和胸腺是B细胞和T细胞发育成熟的器官,称作中枢淋巴器官。 免疫细胞经血管和淋巴管网络在全身循环,并可在淋巴结和脾脏聚集,淋巴结和脾脏称作外周淋巴器官。 上皮细胞下常有淋巴细胞聚集,因无包膜,称作淋巴组织。 (二) 免疫系统能识别自我和非我 3.单克隆抗体的制备 (三) 在细胞表面的分子相互作用引发免疫反应 (四) 免疫球蛋白的结构和类别 1.免疫球蛋白的结构 免疫球蛋白G(IgG)是一类最简单的免疫球蛋白。IgG含有两条相同的重链(heavy chain)和两条相的轻链(light chain)。四条链通过二硫键共价联接成Y字形结构。每一免疫球蛋白分子含有二个抗原结合部位，它们位于Y形结构的二个顶点。 2.免疫球蛋白的类别 按照重链的类型分为: 重链 轻链 IgG γ κ或λ IgA α κ或λ IgM μ κ或λ IgD δ κ或λ IgE ε κ或λ IgM IgG是记忆B细胞引发的再次免疫反应的主要抗体，可以通过胎盘 。IgA是存在于唾液、泪液、乳汁等分泌物的主要抗体，可以是单体、二聚体或三聚体。 IgM是初次免疫反应早期产生的，可以以单体形式与膜结合，或形成5聚体。 IgD主要存在于B细胞表面，功能不详。 IgE与过敏源结合诱导细胞产生组胺和其他活性胺，使血管扩张，渗透性增大，引起炎症反应。 (五) 基于抗体-抗原相互作用的生化分析方法 1.酶联免疫吸附测定 2.免疫印迹测定 1.用选定的抗原免疫小鼠,取出脾脏,制备B淋巴细胞。 2.培养小鼠的骨髓瘤细胞。 3.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。 4.转移到只有杂交瘤细胞才能生长的培养基上,培养选择杂交瘤细胞。 5.用ELISA筛选产生特定单克隆抗体的杂交瘤细胞。 6.用小鼠腹水或培养箱培养选出的杂交瘤细胞。 7.纯化所需的单克隆抗体。 * * 第6章 蛋白质结构与功能的关系 一、肌红蛋白的结构与功能 (一) 肌红蛋白的三级结构 (三) O2与肌红蛋白的结合 MbO2?Mb+O2 K = {[Mb][O2] }/ [MbO2] (1) Y=[MbO2]/{[Mb]+[MbO2]} (2) Y=[O2] / {[O2]+K} 将（1）改写为： [MbO2] = {[Mb][O2] }/ K 并代入（2）得： Log[Y/(1-Y)]=log p(O2) ? logK Y=[O2] / {[O2]+K} =p(O2)/{p(O2)+K} Y K= p(O2)? Y p(O2) = p(O2)(1?Y) Y/ (1?Y)= p(O2)/ K 二、血红蛋白的结构与功能 (一) 血红蛋白的结构 (二) 氧结合引起的血红蛋白构象变化 (四) H+、CO2和BPG对血红蛋白结合氧的影响 1. H+、CO2 促进O2的释放(Bohr效应) 2.BPG降低血红蛋白对氧的亲和力 γ链的143位为丝氨酸，而β链的143位为组氨酸 三、血红蛋白分子病(一) 分子病是遗传的(二)镰刀状细胞贫血病 (三)其他血红蛋白病 突变发生在关键部位会致病，突变发生在非关键部位则不会致病。 (