肠出血性大肠杆菌EHECO104H4检测技术.pptVIP

* * * * * * 毒力基因/抗原特异性基因PCR检测方法 7、aap aap-F： 5’-ATGAAAAAAATTAA GTTTGTTATCTT-3’ aap-R： 5’-TTATTTAACCCATTCG GTTAGAGC-3’ PCR反应体系(20μl)： 10×PCR Buffer (含Mg2+ ) 2μl aap-F 引物 (10μM) 1μl aap-R引物 (10μM) 1μl dNTPs (10mM) 1μl Taq DNA聚合酶 (5U/μl) 0.2μl DNA模板 1μl dH2O 13.8μl PCR反应条件： 94℃ 3min 94℃ 30sec 56℃ 30sec 30循环 72℃ 45sec 72℃ 5min M aap 2000bp 1000bp 750bp 500bp 250bp 100bp 356bp 毒力基因/抗原特异性基因PCR检测方法 8、wzy wzy-F： 5’-AGTTCATTAGATCGAGGTT-3’ wzy-R: 5’-CTCCTTGCAAATGTGCAA-3’ PCR反应体系(20μl)： 10×PCR Buffer (含Mg2+ ) 2μl wzy-F 引物 (10μM) 1μl wzy-R引物 (10μM) 1μl dNTPs (10mM) 1μl Taq DNA聚合酶 (5U/μl) 0.2μl DNA模板 1μl dH2O 13.8μl PCR反应条件： 94℃ 3min 94℃ 30sec 56℃ 30sec 30循环 72℃ 45sec 72℃ 5min M wzy 2000bp 1000bp 750bp 500bp 250bp 100bp 450bp 毒力基因/抗原特异性基因PCR检测方法 9、fliC (H4) fliC-5： 5’-TGA GTG ACC AGA CGA TAA CAG GG-3’ fliC-6: 5’-GGA CGA TTA GTG GGT GAA ATG AGG-3’ PCR反应体系(20μl)： 10×PCR Buffer (含Mg2+ ) 2μl fliC-5 引物 (10μM) 1μl fliC-6引物 (10μM) 1μl dNTPs (10mM) 1μl Taq DNA聚合酶 (5U/μl) 0.2μl DNA模板 1μl dH2O 13.8μl PCR反应条件： 94℃ 3min 94℃ 30sec 65℃ 30sec 30循环 72℃ 90sec 72℃ 7min M fliC 2000bp 1000bp 750bp 500bp 250bp 100bp 1243bp 毒力基因/抗原特异性基因PCR检测方法 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所网站： 毒力基因/抗原特异性基因PCR检测方法 提供检测技术方法、分子分型方法 可提供如下试剂 1、9对PCR引物 2、EHEC O157:H7 EDL933菌株模板 3、EAEC O44:H18 Ec042菌株模板 4、O104 DNA模板 5、H4 DNA模板 上送菌株复核、鉴定 EHEC O104:H4系列检测产品 货号 产品 规格 用途 IM-EH004-97 大肠杆菌O104诊断血清 1ml 免疫学检测 IM-EH001-4 大肠杆菌H4诊断血清 1ml 免疫学检测 Cat.No.CP038 大肠杆菌O104核酸扩增（PCR）检测试剂盒 20次/盒 分子生物学检测 Cat.No.FP017 大肠杆菌O104核酸扩增（PCR-荧光探针法）检测试剂盒 20次/盒 分子生物学检测 Cat.No.FP018 大肠杆菌H4核酸扩增（PCR-荧光探针法）检测试剂盒 20次/盒 分子生物学检测 IMS015-1 大肠杆菌O104免疫磁珠分离检测试剂盒 50次/盒 样品处理 天津生物芯片技术有限责任公司开发了一套针对EHEC O104:H4的系列检测产品。 EHEC O104:H4系列检测产品 联系方式： 022 022谢谢大家！ * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 肠出血性大肠杆菌EHEC O104:H4检测技术 熊 衍 文 xiongyanwen@ 中国疾病预防控制中心传染病所 2011年6月7日 正常菌群，一般不致病 条件致病 某些带有致病基因的血清型，引起肠道感染 细菌居住部位改变引起的肠外感染： 尿路感染最常见 致病菌株 大肠杆菌 H抗原 (鞭毛) O抗原 (LPS侧链) K抗原 (荚膜) F抗原 (菌毛) 复杂的抗原构造? 分类 可引起腹泻的大肠杆菌称为肠道致病性大肠杆菌或致泻性大肠杆