第五讲 抗生.ppt

* 生产中常用活性炭脱色去除热原，但须注意脱色时pH，温度、炭用量及脱色时间等因素，还应考虑它对抗生素的吸附问题，否则会影响抗生素的产量；此外，也可用脱色树脂去除色素(如酚醛树脂，即122树脂)。对某些产品可用超微过滤办法去除热原，还应加强在生产过程中的环境卫生以防止热原。 * B 结晶和重结晶 常用的几种结晶方法如下： (1) 改变温度结晶 利用抗生素在溶剂中的溶解度随温度变化而显著变化的这一特性来进行结晶。例如制霉菌素的浓缩液在5℃条件下保持4h~6h后即结晶完全。分离掉母液、洗涤、干燥、磨粉后即得到制霉菌素成品。 * (2) 利用等电点结晶 当将某一抗生素溶液的pH调到等电点时,它在水溶液中溶解度最小，则沉淀析出。如6-氨基青霉烷酸(6-APA)水溶液当pH调至等电点(4.3)时，6-APA即从水溶液中沉淀析出。 (3) 加成盐剂结晶 在抗生素溶液中加成盐剂(酸、碱或盐类)使抗生素以盐的形式从溶液中沉淀结晶。例如在青霉素G或头孢菌素C的浓缩液中加入醋酸钾、即生成钾盐析出。 * (4) 加入不同溶剂结晶 利用抗生素在不同溶剂中溶解度大小的不同，在含抗生素的某一溶剂中加入另一溶剂使抗生素析出。如巴龙霉素具有易溶于水而不溶于乙醇的性质。在其浓缩液中加入10~12倍体积的95%乙醇，并调pH至7.2~7.3使其结晶析出。 重结晶是进一步精制以获高纯度抗生素的有效方法． * C 其他精制方法 其他精制方法包括： (1) 共沸蒸馏法 如青霉素可用丁醇或醋酸丁酯以共沸蒸 馏进行精制。 (2) 柱层析法 如丝裂霉素A、B、C三种组分可以通过氧 化铝层析来分离。 (3) 盐析法 如在头孢噻吩水溶液中加入氯化钠使其饱 和，其粗晶即被析出后进一步精制。 * (4) 中间盐转移法 如四环素碱与尿素能形成复盐沉淀后再将其分解，使四环素碱析出。用此法以除去4-差向四环素等异物，以提高四环素质量和纯度，又如红霉素能与草酸或乳酸盐或复盐沉淀等。 (5) 分子筛 如青霉素粗品中常含聚合物等高分子杂质，可用葡聚糖凝胶G-25(粒度20~80μm）将杂质分离掉。此法仅用于小试验。 * 成品检验 为了保证药物的质量，用药的安全，对抗生素各种成品都必须进行检验。常规检验包括性状及鉴别试验、安全试验、降压试验、热原试验、无菌试验、酸碱度测定、效价测定、水分测定、混浊度测定、色泽颗粒细度测定等等。 * 成品分包装 抗生素原料药除进行成品大包装外，还须由制剂厂（或制剂车间）再进行分包装，如果是注射用抗生素，尚须在无菌条件下，进行小瓶分装以供临床应用。 * 3 抗生素发酵生产的特性 （1） 抗生素发酵生产的特点 （2） 抗生素发酵生产的特殊问题 * （1） 抗生素发酵生产的特点 菌体生长与产物形成的不平行性 理论产量难以用物料平衡来计算 稳定性差 * 菌体生长与产物形成的不平行性（1） 抗生素是其生产菌的次级代谢产物，而不是初级代谢产物，所以抗生素并不是在生产菌体生长繁殖时大量形成的，而是在菌体生长繁殖至一定阶段后才大量合成的。因此抗生素的发酵环节分为菌丝增长繁殖过程和抗生素的分泌合成过程。 * 在发酵中，菌丝太少，当然抗生素产量低，但是菌丝生长繁殖太旺盛，菌体浓度过浓，抗生素的产量并不是相应的最高，即生长与产物形成的不平行性。要提高抗生素产量，一般都是让菌体在发酵初期迅速生长、繁殖，达到菌体浓度后，想尽办法延长第二阶段的时间，即抗生素合成分泌阶段的时间，合成分泌更多的抗生素。 * 理论产量难以用物料平衡来计算（2） 一般的工业发酵中，产物多为微生物利用碳源物质后的代谢产物，其理论产量可以从物料平衡关系中计算出来。化学合成药物生产中，其理论产量更可以通过参加反应物的浓度消耗与生成产物浓度增加的平衡中计算。 * 但是抗生素是产生菌次级代谢的产物。目前对微生物的次级代谢过程和次级代谢变化了解不完全，故抗生素的理论产量难以用物料平衡关系来计算。现在生产中发酵前对抗生素理论产量的预测都是靠经验，根据以前的生产情况作出来的。 * 稳定性差（3） 由于生产菌种的变异退化，发酵所用的培养基成分以及原材料质量，中间代谢的控制，设备条件，操作条件等因素的差异，通常各批发酵所生产的抗生素是不同的，一般波动幅度为10%。 * 由于抗生素的稳定性不同，即使放罐的发酵单位相同，因提炼工艺，操作方法的不同，最终所得抗生素成品产量也会略有差异。有时菌种的退化变异会造成整个发酵过程的失败。所以，要使抗生素发酵生产稳定，就必须努力使生产菌种的遗传性状稳定，设备条件和生产工艺条件稳定，人员的操作规范稳定。 * （2） 抗生素发酵生产的特殊