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- 2017-05-14 发布于湖北
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第十一章 糖
* * 质谱分析法: 关键问题是离子化:快原子轰击(FAB)、电喷雾离子化(ESI)和基体协助激光解吸离子化(MALDI)软电离技术都适用于糖类分析。 飞行时间质谱(TOF-MS)和傅立叶变换质谱(FT-MS)测大分子糖的分子量要比光散射法或凝胶渗透法精度高得多,特别是LC/MS和MS/MS分析法更有用。 * * MALDI-TOF/MS用于测量寡糖的分子量,源后衰减技术(Postsource Decay, PSD)用于测寡糖结构。 最有效的方法还是MALDI-FT-MS/MS法。 * * 步骤 酶降解糖复合物,切割寡糖链; HPLC分离纯化 质谱分析 得出结论后,用其他方法核证,如GC/MS,MS/MS和NMR等 * * 6.3 糖的酶法分析 当化学分析法达不到分析特异性的要求,采用酶分析法 通常可以在各种异构体的混合物中实现对某一种的选择性测定,并能区分α和β构型 常用的酶: β-半乳糖苷酶、α-葡萄糖苷酶、 α-半乳糖苷酶等 * * 6.3.1 基于葡萄糖氧化酶的葡萄糖分析 β-D-葡萄糖+O2+H2O D-葡糖酸+H2O2 α-D-葡萄糖被氧化的反应速率低于β-D-葡萄糖的1% α-D-葡萄糖与β-D-葡萄糖两种异构体以平衡的形式存在,在变旋酶的作用下α向β不断转化,最终使得反应进行完全。 * * 基于显色反应的过氧化氢分析 上述反应所产生的过氧化氢可以用显
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