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第二章 酶工程基础 第一节 酶的分类和命名 第二节 酶的化学本质、来源和生产 第三节 酶催化原理 第四节 酶催化反应动力学 第一节 酶的分类和命名 一．酶的分类： 1．氧化还原酶 2．转移酶 3．水解酶 4．裂合酶 5．异构酶 6．连接酶（合成酶） 7．核酸酶（催化核酸） 1．氧化还原酶 (Oxidoreductase) 包括脱氢酶(Dehydrogenase) 、氧化酶(Oxidase) 、过氧化物酶、氧合酶、细胞色素氧化酶等 如乳酸(Lactate)脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。 2．转移酶(Transferase) 包括酮醛基转移酶、酰基转移酶、糖苷基转移酶、含氮基转移酶等 例如， 谷丙转氨酶催化的氨基转移反应。 3．水解酶(Hydrolase) 脂肪酶、糖苷酶、肽酶等，水解酶一般不需辅酶 主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。 例如，脂肪酶(Lipase)催化的脂的水解反应： 4．裂合酶(Lyase) 这类酶可脱去底物上某一基团留下双键，或可相反地在双键处加入某一基团。 主要包括醛缩酶、水化酶及脱氨酶等。 例如， 延胡索酸水合酶催化的反应。 5．异构酶(Isomerase) 此类酶为生物代谢需要对某些物质进行分子异构化，分别进行外消旋、差向异构、顺反异构等例如，6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。 6．连接酶（合成酶）(Ligase or Synthetase) 7.核酸酶（催化核酸） Ribozyme 核酸酶是唯一的非蛋白酶。它是一类特殊的RNA，能够催化RNA分子中的磷酸酯键的水解及其逆反应。 酶用于生物催化的概况 第二节 酶的化学本质、来源和生产 一、酶催化功能的结构基础 Ⅰ 酶是蛋白质 Ⅱ 酶分子的组 Ⅲ 酶蛋白分子的结构特征 Ⅳ 维持酶蛋白分子构象的力 Ⅴ 酶蛋白一级结构与空间构像的关系 Ⅵ 酶的活性部位 Ⅰ 酶的化学本质 Ⅱ 酶分子的组成 Ⅲ 酶蛋白分子的结构特征 Ⅴ 酶蛋白一级结构与空间构像的关系 一级结构决定了蛋白质的空间结构 实验证据：在8mol/L尿素存在下，用巯基乙醇处理天然RNase，其二硫键全部断裂，肽链松散，活性全部丧失。 Ⅵ 酶的活性部位 酶是生物大分子物质，分子量都在10000以上，至少每个酶分子由100个以上氨基酸连接而成，然而，只有少数一些氨基酸残基和催化活力有关，这些特异的氨基酸残基组成了酶的活性中心。 酶与其他蛋白质的不同之处在于，酶分子在一级结构基础上通过二三级折叠盘绕,形成了各自特定的具有催化功能的活性构像区域，酶分子不是以整个分子，而是在这个区域内参与和底物结合并对底物进行催化反应。 活性中心的本质 活性中心是酶分子中与催化功能直接有关并在三维结构上相互靠近的少数几个aa残基或其上的某些基团按照特定立体构象组成的活性结构区域.（是与底物结合并催化反应的场所） 活性中心的特点： 仅为酶分子的少数几个残基由于肽链的盘绕折叠而成； 是由特定空间构象维持的一个裂隙； 活性中心以外的部分对活性中心形成提供结构基础。 活性中心包括催化部位和底物结合部位 催化部位：在催化反应中直接参与电子授受关系的部位，直接参与催化，底物敏感键在此被切断或形成新键，并形成产物。 底物结合部位：指与底物特异结合的有关部位，也叫特异性决定部位。 二、酶的生产 酶的获得是酶和酶工程研究的主要内容之一，包括酶的生产与提取纯化。 1、酶的来源、 2、发酵生产、 3、提高酶产量的方法、 4、提取纯化、 5、纯度与回收率 酶的来源 1、动植物原料提取 —— 早期多为采用 例如：用动物脏器、麦芽、木瓜、菠萝等提取各种酶。（尿激酶、蚓激酶、凝血酶、抑肽酶、糜蛋白酶、透明质酸酶等) 2、动植物细胞培养 —— 近二十年来研究 3、 微生物发酵 目前工业应用酶大多数来自微生物 以微生物为生产原料有许多优点： 酶的发酵生产 目前投入工业发酵生产的酶约有60~70种，它们的生产菌种十分广泛，包括细菌、放线菌、酵母菌、霉菌 其中大规模工业生产的只有将近20~30种。 目前工业用酶中， 蛋白酶占59%， 糖化酶13%， α-淀粉酶5%， 葡萄糖异构酶6%， 果胶酶3%， 纤维素酶1%， 脂肪酶3%， 医药与分析研究用酶占10%。 发酵条件对产酶的影响 1、培养基　　 　2、pH值 3、温度　　　 　4、溶解氧