贾琼-仪器分析 4-高效液相色谱法.pptVIP

第四章 高效液相色谱法 1．高效液相色谱法与经典液相色谱法比较 ⑴ 高速：HPLC分离效率高，速度快，一次几分钟和几十分钟就可完成。色谱柱的寿命长，可达两年以上。 ⑵ 高效：HPLC高压(2~6 MPa)下操作，填料颗粒小(2~50 ?m)，规则均匀的固定相，传质阻力小，柱效高(N = 4000~60000 块/m)，分离效率高。 ⑶ 高灵敏度：现代高效液相色谱仪普遍配有高灵敏度检测器，使分析灵敏度比经典色谱有大提高（紫外检测器最小检测限可达10-9 g；荧光检测器最小检测限可达10-11~10-13 g。 ⑷ 高自动化：HPLC进样量小(x~x0 ?L)。带有自动进样装置和工作站。 ⑶ 色谱柱 GC柱很长，特别是毛细管柱可长至几十米至上百米，柱效很高(理论塔板数N = 104~106)。HPLC柱较短，一般为15~25 cm，柱效(理论塔板数N = 103~104)，低于GC柱。 ⑷ 检测器 与GC相比，HPLC检测器种类较多。 ⑸ 制备色谱 GC难以制备样品，因为进样量小，难以收集或被破坏。HPLC可进行制备，即制备色谱。 一﹑高效液相色谱仪的结构 一般分为4个主要部分：高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。此外还配有辅助装置：如梯度洗脱、自动进样及数据处理等。 工