血清5’-核苷酸酶测定的临床价值及方法学进展.pdfVIP

上虞市创烨生物有限公司 地址：浙江省上虞市高新技术产业园区鸿天工业园 电话：0575 传真：0575 网址： 邮箱：sales@ 血清5’-核苷酸酶测定的临床价值及方法学进展 摘要 ：对5’-核苷酸酶的结构，临床意义和近年来的方法学发展趋势做了评 述。对检测5’-核苷酸酶的新技术进行了展望。 关键词：5’-核苷酸酶，方法学，化学发光，进展，综述。 一、5’-核苷酸酶的分类和结构 5’-核苷酸酶（5’-Nucleotidase, 5’-NT ）广泛分布于细菌、植物细胞和脊椎动 物组织。是一种催化核苷-5’-单磷酸水解生成核苷和无机磷酸盐的酶。目前为止, 在哺乳动物中已发现多种 5’-核苷酸酶,依据其细胞定位、作用底物和生化特征, [1] 可分为以下六种形式 ：胞外-5’-核苷酸酶(ecto-5’nucleotidase,e-N)、胞浆-5’-核 苷酸酶I 型( cytoplasmic-5’-nucleotidase -I ,e-N-I) 、胞浆-5’- 核苷酸酶Ⅱ型 ( cyto-plasmic-5’- nucleotidase- Ⅱ,e-N- Ⅱ) 、胞浆 5’-(3’) 脱氧核糖核苷酸酶 [2] (dNT-1)、线粒体-5’(3’) 脱氧核糖核苷酸酶(dNT-2) 。 人血清 5’-核苷酸酶均来自胞膜, 即胞外 5’-核苷酸酶，其活性水平为 3～ 12μmol/ L 磷酸。在细胞胞浆内也有5’-核苷酸酶,但其特征性、分子大小均与前 [3] 者有区别,且缺乏疏水区,5’-核苷酸酶的主要功能是参与核酸的分解代谢 。 5’-核苷酸酶作为一种糖蛋白。由两个分子量为70 000 的亚基组成,是含一个 疏水区结构的二聚体。采用两性离子剂和免疫吸附电泳得血清5’- NT 分子量70 000 具有胞外酶的特征, 通过糖基-磷脂酰肌醇(GPI)锚定于细胞膜外表面[4],它是 [5-6] 细胞膜上二聚体解聚后形成的寡聚体, 由细胞膜上脱落并经代谢而产生 广泛 表达于人体组织细胞表面,包括肝细胞、成纤维细胞、内皮细胞、淋巴细胞和神 经胶质细胞、近端肾小管上皮细胞等[7]最适pH 为6.6~7.0, 受Mg2+ 或Mn2+ 激活 [8,9] 2+ [10] , 为Ni 所抑制 , 1 上虞市创烨生物有限公司 地址：浙江省上虞市高新技术产业园区鸿天工业园 电话：0575 传真：0575 网址： 邮箱：sales@ 二、临床意义 1、 5’-NT活性增高常见于原发性和转移性肝癌，慢性肝炎，肝硬化，病毒 [11-12] [13] 性肝炎, 梗阻性黄疸 胆结石. 胆囊炎 等。其活性增高可达2～6 倍，且与病 情严重程度呈正相关。 2 、5-NT是诊断肝肿瘤及消化道肿瘤及消化道恶性肿瘤非常灵敏的酶学指 标。在病变早期，当肝功能、肝扫描和有关肝病检查阴性时本酶活性已明显增高。 对于AFP 阴性病例，其与AFP互补诊断肝癌的阳性率可达94 ％。 3 、5-NT特异性高，能协助判断碱性磷酸酶（ALP ）增设是肝胆系统疾病， 还是骨髓系统疾病（如骨癌、骨肉瘤、骨转移癌、佝偻病等）。ALP在肝胆系统 疾病和骨骼系统疾病时均可增高。除 5-NT除肝胆系统疾病增高外，骨骼系统疾 [14] 病一般均不升高 。 4 、有助于鉴别诊断肝细胞性黄疸和阻塞性黄疸。后者5-NT 明显高于前者， 及发生胆汁淤积的高于未发生胆汁淤积的患者[15]