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肿瘤研究与实验动物 博、硕士研究生 You see a mouse.We see a cure for cancer. 干扰机体对致癌物解毒功能；改变致癌物质分子结构；加快肠道排空速度，影响致癌物吸收。 人结肠癌与环境因素密切相关，肠道菌群与进入肠道的环境中物质关系正在研究。 无胸腺大、小鼠： 1966年，英国爱丁堡动物所Flanagan发现裸小鼠。表现为：全身无毛，先天性无胸腺，T淋巴细胞缺失，细胞免疫功能缺陷，对异体移植物无排斥反应，可接受异体肿瘤移植。 人类肿瘤异体移植此前基本不可能成活，在某些特殊条件下-----动物经放射线照射，可的松处理，胸腺摘除或给予抗淋巴细胞抗体等措施，偶然得以成活。发现裸鼠，建立可移植性人体肿瘤数百种，瘤株能防止由传代而伴随肿瘤组织形态学退化，保持原代细胞各种功能。裸鼠原种抵抗力差，生育力低，寿命短，不能用于实际，与纯系BALB/C、NIH和C3H小鼠交配，不断繁育，获得几种近交系无胸腺裸鼠新种。 目前繁殖裸鼠不用nu/nu雌鼠，因其繁殖性能低，一般采用杂合子交配方式或隐性纯合子雄性与杂合子雌鼠交配。此交配方法，其后代将出现表现型正常的仔鼠和裸鼠，比例为1：1。 纯合性雌裸鼠（nu/nu）受孕率低，乳腺发育不良，且有食崽习惯。一般采用纯合性雄鼠与杂合性雌鼠（nu/+）交配，可获的1/2纯合性后代。裸小鼠年龄增长或一些因素影响（病毒感染等），裸鼠体内正常T细胞增加，影响接种，一般选用4-8Wk。 新型免疫缺陷动物： 皮下移植于裸鼠人类恶性肿瘤，外科手术标本或体外培养细胞，原宿主体内是否转移，仅表现成活，低转移或不转移，形成局限性肿瘤，不易扩散。 提高裸鼠体内人类肿瘤转移性，改变宿主状态做大量工作：应用三周内幼鼠；附加各种射线照射；各种免疫抑制剂；提高裸鼠饲养洁净度减少Ag刺激，不满意。 世界各国相继培育出一系列免疫缺陷A：从单一T细胞功能缺陷到T、NK细胞（Beige-nu mice）缺陷，T、B细胞以及T、B 、NK细胞联合缺陷动物，肿瘤转移模型建立了新宿主A和研究工具。 T、NK细胞缺陷的Beige-nude Mice： 13号染色体缺陷。孙靖等将有T细胞缺陷无胸腺nude Mice Nu gene导入NK细胞缺陷 beige -Mice，育成T、NK细胞功能联合免疫缺陷beige-Mice，其体内转移瘤显著高于裸鼠组。 91年9月召开的第七届国际免疫缺陷A研讨会，引人注目一项发展是用人体淋巴细胞改建的Scid mice —研究人类免疫缺陷型病毒（HIV）感染模型。 T、B细胞联合缺陷Scid mice（Serious Conjunctive immune deficiency）： 由美国Bosma等发现并培育成功。BALB/cAn小鼠同类系C.B.-17近交系16号染色体基因突变形成。（DNA-PKcs：DNA依赖性蛋白催化亚单位基因缺陷）----16号染色体影响淋巴细胞抗原受体催化亚单位基因突变，编码结合点断裂。接受人类肿瘤移植后，成活率高，易于发生浸润和转移，在白血病和淋巴瘤的研究中更为突出，其病理过程和与人白血病的临床过程极为相似；植入人免疫系统称（SCID-hu）。 过去靠临床观察、体外实验或无免疫缺陷动物研究人免疫系统。人免疫系统结构复杂，功能繁多，影响面广，体外实验完全没有体内实验的整体效果，实验动物又与人存在着巨大种质差异，敏感性不同。寻找廉价、简单适用人免疫研究动物模型是生物医学者目标。 Orthotopic xenotransplantation（原位异种移植）： 人癌移植到与肿瘤原位部位相对应的裸鼠器官组织内，使其获得与人癌相似微环境。 Scid mice---腹腔注射—胎肝活细胞—人胎肝活细胞Scid小鼠模型。注射胸腺细胞--人胎肝活细胞Scid小鼠模型(1)。再注射胸腺细胞--人胎肝活细胞Scid小鼠模型（2）。（1）、（2）进行人肝癌细胞免疫—初始免疫反应。模型（1）、（2）抗体最高滴度出现时间无显著差异；出现水平差异显著（2）（1）。8只Scid 小鼠建模后4个月未出现瘦弱、贫血与死亡，无GVHR。 * * 本次课需掌握的内容： 肿瘤与实验动物的关系 肿瘤研究与免疫缺陷动物 实验动物在肿瘤学研究中的作用 肿瘤（Tumor），恶性肿瘤（Cancer）是危害人类生命健康最严重疾病之一。WHO预测21世纪癌症将成为人类第一杀手。近20年来，我国癌症发病率和死亡率呈明显上升趋势，死亡率由83.65/10万~10