原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
脱毛碱性蛋白酶定点突变的初步分析.pdf
2010 年 7 月 四川大学学报(自然科学版) Ju l. 2010
第 47 卷第4 期 Journal of Sichuan University (Natural Science Edition) Vo l. 47 No.4
doi: 103969/j. issn. 0490-6756. 2010. 04. 048
·快报·
脱毛碱性蛋白酶定点突变的初步分析
杨庆军，张小伟，冯 红，张义正
(四川大学生命科学学院四川省分子生物学与生物技术重点实验室，成都 610064)
摘 要:来自于 Bacillus pumilus 菌株 BA06 的碱性蛋白酶 DHAP 具有良好的脱毛能力.为
了更好地了解 DHAP 的催化特性和进一步改造使之更加符合制革工艺的要求，根据蛋白质
同源建模和嗜冷嗜热酶氨基酸组成的统计分析结果，确定了 13 个氨基酸位点进行定点突变.
通过牛奶平板和对粗酶液在不同温度和热稳定性方面的活性进行了分析.结果发现位于
DHAP 空间结构上底物结合口袋开口处 α 螺旋上的氨基酸残基(E220 ， V223 和 K244) 严
重影响酶的活性;位于底物结合口袋袋底的三个保守位点 V256L、 V2571 和 V2581 在常温(28
OC) 下保留了较高的活性，同时也影响热稳定性;靠近活性位点D140 的 V201Y 突变体可能
直接通过与 D140 的相互作用，导致活性急剧下降.
关键词:脱毛蛋白酶;温度适应性;定点突变;枯草芽抱杆菌
中图分类哥: Q816 文献标识码:A 文章编号: 0490-6756(2010)04-0936-05
Primary analysis of the site-directed mutants in the
dehairing alkaline protease
YANG Qing-Jun , ZHANG Xiao-Wei , FENG Hong , ZHANG Yi-Zheng
(Key Laboratory of Molecular Biology and Biotechnology of Sichuan Province ,
College of Life Sciences , Sichuan University , Chengdu 610064 , China)
Abstract: The alkaline proteases DHAP , which produced by Bacillus 户umilus BA06 , is capacity of hide
dehairing. In order to get more insights into catalytic properties , and for improving the performance of
DHAP in leather processing , 13 residues were selected for site-directed mutagenesis based on the homol
ogy modeling of DHAP and statistic analysis on the amino acid compositions of the cold-adapted and
thermo-enzymes. The activities were assayed on milk-containing plates and with the raw enzymes at dif
ferent temperatures. The results showed that thre
文档评论（0）